綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

（1）前期準(zhǔn)備：（A）處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；

（2）按比例配制培養(yǎng)材料；

（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；

（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；

（5）分離并檢測(cè)；

（6）取液儲(chǔ)存；通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。

產(chǎn)品名稱：固囊酵母

拉丁文： Citeromyces matritensis

提供形式： 凍干物

**等級(jí)： 1

模式菌株： yes

應(yīng)用領(lǐng)域： 模式菌株

使用范圍：

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚，組成成分，重復(fù)性強(qiáng)，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。 

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)**。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營(yíng)養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。 

培養(yǎng)及打管說(shuō)明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

保藏方法：

1. 傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧**用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2. 液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。

3. 載體保藏法

是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。

5. 冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。

3,5-二氯吡分子式：147.99英文名稱：3,5- twoCAS號(hào)：2457-47-8分子量： C5H3Cl2N

5-碘尿嘧分子式：237.98英文名稱：5- iodouracilCAS號(hào)：696-07-1分子量： C4H3IN2O2

2-巰并咪唑分子式：150.2英文名稱：2- mercaptobenzimidazolesCAS號(hào)：583-39-1分子量： C7H6N2S

3-溴三氟硼酸鉀分子式：262.9英文名稱：3- Bromophenyl three kbf4CAS號(hào)：374564-34-8分子量： C6H4BBrF3K

鄰二酚紫英文名稱：Pyrocatechol violet分子式：386.38分子量： C19H14O7SCAS號(hào)：115-41-3

4-溴-3-氟碘分子式：300.89英文名稱：4- bromo -3- fluoro iodoCAS號(hào)：136434-77-0分子量： C6H3BrFI

2,5-二氯-4-(三氟甲)吡分子式：215.99英文名稱：2,5- two chloride -4- (three f) pyridineCAS號(hào)：89719-92-6分子量： C6H2Cl2F3N

四氯二砜分子式：356.05英文名稱：Four CL twoCAS號(hào)：116-29-0分子量： C12H6Cl4O2S

5,6-雙(正辛氧代)-2,1,3-并噻唑分子式：393英文名稱：5,6- (double octyl oxo) -2,1,3- benzothiazoleCAS號(hào)：1254353-37-1分子量： C22H36N2O2S

2--7-溴并噻唑分子式：229.097英文名稱：2- 7 -溴并噻唑CAS號(hào)：20358-05-8分子量： C7H5BrN2S

3-溴甲砜分子式：235.1英文名稱：3- methyl bromideCAS號(hào)：34896-80-5分子量： C7H7BrO2S

固囊酵母人超氧化物歧化酶(SOD)  2V6.11(胚腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人空泡相關(guān)蛋白A(VacA)  A3(T細(xì)胞白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人延伸蛋白(elongin)  A7r5(大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)  AML-193(急性單核細(xì)胞白血病單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

鴨胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)  B16-F1(小鼠黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)  B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

綿羊瘦素（leptin）ELISA試劑盒  BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人蛋白聚糖(PG)  BEL-7405(肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人硫氧還蛋白還原酶(TrxR)  Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(HGFR/ c-MET)ELISA試劑盒  BT-20(乳腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

人幽門螺旋桿熱休克蛋白60（HP-HSP60）ELISA試劑盒  BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2