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產(chǎn)品名稱：德氏乳桿菌保加利亞亞種

拉丁文： Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus

提供形式： 凍干物

**等級： 1

模式菌株： no

應(yīng)用領(lǐng)域： 用于益生菌類保健食品生產(chǎn)。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍廣的微生物保存法。

2-羥-5-甲吡分子式：109.13英文名稱：2- hydroxy -5- methyl pyridineCAS號：1003-68-5分子量： C6H7NO

2,3-二溴-6,7-二萘分子式：335.99英文名稱：2,3- dibromo -6,7- two cyano naphthaleneCAS號：74815-81-9分子量： C12H4Br2N2

茜素黃R鈉鹽英文名稱：Alizarin Yellow R sodium salt分子式：309.21分子量： C13H8N3NaO5CAS號：1718-34-9

4-Boc-2-羥甲啡啉分子式：217.26英文名稱：4-Boc-2- hydroxy methyl morpholineCAS號：135065-69-9分子量： C10H19NO4

新癸酸鈷分子式：英文名稱：Cobalt neocaprateCAS號：分子量： Co(C10H19O2)2

四氯酞英文名稱：Four + phthalide分子式：271.9分子量： C8H2Cl4O2CAS號：27355-22-2

2--5-硝嘧分子式：140.1英文名稱：2- amino -5- nitro groupCAS號：3073-77-6分子量： C4H4N4O2

六甲分子式：162.27英文名稱：Six methyl benzeneCAS號：87-85-4分子量： C12H18

3-甲分子式：99.17英文名稱：3- methyl piperidineCAS號：626-56-2分子量： C6H13N

蒽英文名稱：Anthracene分子式：178.23分子量： C14H10CAS號：120-12-7

(煙嗪)2,6-二氯-5-氟-3-吡分子式：190.99英文名稱：(smoke piperazidine) 2,6- two -5- chlorine fluoride -3- cyanopyridineCAS號：82671-02-1分子量： C6HCl2FN2

德氏乳桿菌保加利亞亞種人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)  J774A.1(小鼠單核巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2

人膜輔蛋白(MCP/CD46)  K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞) 5×106cells/瓶×2

人組胺(HIS)  KATO III(胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)  KiMA(胚腎上皮細胞系) 5×106cells/瓶×2

 犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)  KP-N-NS(腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2

大鼠血清一氧化氮(NO)  L Wnt-3A(小鼠皮下結(jié)締組織細胞) 5×106cells/瓶×2

人β2整合素(integrin β2/CD11+CD18)  LA795(小鼠肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人抗巨噬細胞抗體(anti-macrophage Ab)  LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細胞) 5×106cells/瓶×2

人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)  MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14) 5×106cells/瓶×2

植物**酸甲酯（MeJA）  MDA-MB-157(乳腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠補體蛋白4(C4)  MCF 7B(乳腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

使用范圍：

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚，組成成分，重復(fù)性強，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。 

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)。這類培養(yǎng)基的化學成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎(chǔ)上適當加入已知成分的無機鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。 

微生物培養(yǎng)方法：

1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。

上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：

a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。

c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。