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產(chǎn)品名稱：中國倉鼠肺細胞

產(chǎn)品英文：CHL

貨號：BH-X019732

細胞培養(yǎng)條件：DMEM+10%FBS +1%P/S

生長狀態(tài)：貼壁生長

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

主要功能：

（1）血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。

（2）表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。

（3）與血管的進展和穩(wěn)定有關(guān)。

 生理變化：

（1）主動脈硬化。

（2）主動脈瘤

（3）主動脈鈣化。

基本特性：

（1）組織來源于正常大鼠大動脈組織。

（2）鑒定：肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin熒光染色。

（3）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。

（4）每凍存管細胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。

（5）肌動蛋白，alpha-SMA和Desmin熒光染色驗證。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。

培養(yǎng)步驟：

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

高分子量神經(jīng)絲蛋白抗體  Anti-NF-H   0.1ml

核因子/k基因結(jié)合核因子抗體  Anti-NFKBp65   0.1ml

低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體  Anti-NF-L   0.1ml

中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體  Anti-NF-M    0.1ml

核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗體  Anti-NF-κBp50   0.1ml

神經(jīng)生長因子受體抗體  Anti-NGF-R/p75NTR/CD271   0.1ml

神經(jīng)生長因子-β抗體  Anti-NGF-β   0.1ml

中國倉鼠肺細胞Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)elisa檢測試劑盒英文名稱：CTXⅠ ELISA Kit，英文縮寫：CTXⅠ，產(chǎn)品別名：Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)ELISA檢測試劑盒，Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

組織因子途徑抑制物(TFPI)elisa檢測試劑盒英文名稱：TFPI ELISA Kit，英文縮寫：TFPI，產(chǎn)品別名：組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA檢測試劑盒，組織因子途徑抑制物(TFPI)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

43kDa核孔蛋白(NUP43)elisa檢測試劑盒英文名稱：NUP43 ELISA Kit，英文縮寫：NUP43，產(chǎn)品別名：43kDa核孔蛋白(NUP43)ELISA檢測試劑盒，43kDa核孔蛋白(NUP43)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

轉(zhuǎn)化生長因子β受體2(TGFβR2)elisa檢測試劑盒英文名稱：TGFβR2 ELISA Kit，英文縮寫：TGFβR2，產(chǎn)品別名：轉(zhuǎn)化生長因子β受體2(TGFβR2)ELISA檢測試劑盒，轉(zhuǎn)化生長因子β受體2(TGFβR2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

腫瘤壞死因子β(TNFβ)elisa檢測試劑盒英文名稱：TNFβ ELISA Kit，英文縮寫：TNFβ，產(chǎn)品別名：腫瘤壞死因子β(TNFβ)ELISA檢測試劑盒，腫瘤壞死因子β(TNFβ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)elisa檢測試劑盒英文名稱：LAM ELISA Kit，英文縮寫：LAM，產(chǎn)品別名：脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA檢測試劑盒，脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

孕烯醇酮(PREG)elisa檢測試劑盒英文名稱：PREG ELISA Kit，英文縮寫：PREG，產(chǎn)品別名：孕烯醇酮(PREG)ELISA檢測試劑盒，孕烯醇酮(PREG)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)elisa檢測試劑盒英文名稱：hnRNP K ELISA Kit，英文縮寫：hnRNP K，產(chǎn)品別名：異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)ELISA檢測試劑盒，異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)elisa檢測試劑盒英文名稱：IGFBP-5 ELISA Kit，英文縮寫：IGFBP-5，產(chǎn)品別名：胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)ELISA檢測試劑盒，胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

循環(huán)復(fù)合物(CIC)elisa檢測試劑盒英文名稱：CIC ELISA Kit，英文縮寫：CIC，產(chǎn)品別名：循環(huán)復(fù)合物(CIC)ELISA檢測試劑盒，循環(huán)復(fù)合物(CIC)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)elisa檢測試劑盒英文名稱：SGK2 ELISA Kit，英文縮寫：SGK2，產(chǎn)品別名：血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)ELISA檢測試劑盒，血清/糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶2(SGK2)檢測試劑盒產(chǎn)品保存：2~8℃、有效期6個月。

操作要點：

1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。

2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過*易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。

4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。

5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6）觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。