細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	A172人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞	英文名稱	A172:A172
產(chǎn)品貨號	A01X637	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	成纖維細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	腦；膠質(zhì)母細(xì)胞瘤	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

生長培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 A172細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中可形成克?。籄172細(xì)胞在抑制小鼠中不成瘤。

年齡（性別） 男；53歲

組織來源 腦；膠質(zhì)母細(xì)胞瘤

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 膠質(zhì)瘤細(xì)胞

生物等級 1

倍增時間 ~40 hours

致瘤性 No, the cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice.Yes, form colonies in semisolid medium.

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1620 ATCC; CRL-7899ECACC; 88062428

胰島素重組兔單克隆抗體    Insulin

膜粘連蛋白11抗體    Annexin A11

組織YES激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）    人可溶性腫瘤壞死因子樣細(xì)胞凋亡弱誘導(dǎo)因（sTweak）elisa檢測試劑盒

大鼠甲胎蛋白（AFP）elisa檢測試劑盒    豬谷氨酰胺合成酶(GS)elisa分析檢測試劑盒

26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型p55抗體    PSMD12

周期素依賴性激酶5激活結(jié)合蛋白C53抗體   CDK5RAP3

泛素結(jié)合酶E2J1抗體  Anti-UBC6e/UBE2J1    妊娠區(qū)帶蛋白PZP抗體  Anti-Pregnancy zone protein

ETS結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子FEV抗體  Anti-Pet1/FEV    磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗體  Anti-phospho-14-3-3 protein zeta/delta(Ser58)

PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗人IgG H&L    Donkey Anti-Human IgG H&L / PE-Cy5.5

鋅指蛋白903抗體    ZBTB4

牛胰島素(Insulin)elisa分析檢測試劑盒    Bovine Insulin ELISA kit

小鼠骨特性堿性磷酸酶(BALP)elisa分析檢測試劑盒    BALPELISAkit

倉鼠載脂蛋白B(APOB)elisa分析檢測試劑盒    APOB ELISA kit

A172人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞人對氨基苯甲酸(PABA)elisa分析檢測試劑盒    PABAELISAKit

白介素11受體α/IL-11Rα抗體    IL-11RA

1號染色體開放閱讀框147抗體    C1orf147

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。