細胞系實驗步驟：

?一、細胞培養(yǎng)準備?：
?生物柜的使用?：確保所有接觸細胞的物品都在生物柜中通過紫外，防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?：提供細胞生長的環(huán)境，保持恒定的溫度（通常為37℃）?。
?培養(yǎng)基和血清?：特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì)，如糖、氨基酸和維生素，添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細胞培養(yǎng)過程?：
?細胞接收與記錄?：記錄細胞系的相關(guān)信息，包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細胞形態(tài)觀察?：定期檢查細胞的形態(tài)和行為，確保細胞狀態(tài)健康，無污染?。
?細胞傳代?：當細胞密度超過80%時進行傳代，注意消化時間和條件，避免細胞損傷?。
三、?細胞系鑒定與維護?：
?細胞系鑒定?：通過STR圖譜確定細胞的遺傳特征，防止細胞系被誤認或交叉污染?。
?細胞保存與管理?：定期進行細胞冷凍保存，確保細胞的長期存活和可用性?。

本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

商品屬性：

產(chǎn)品貨號	AXB9878	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
產(chǎn)品分類	人細胞系	產(chǎn)品種屬	人
生長特性	貼壁生長	細胞形態(tài)	上皮細胞樣
英文名稱	A549/DDP	組織來源	肺

商品介紹：

細胞別稱；A549/DDP；人非小細胞肺癌細胞順鉑耐藥株

種屬來源；人

組織來源；肺

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；上皮細胞樣

特別提醒；待細胞長到70-80%的匯合度時，去掉培養(yǎng)液，加入含 500ng/ml DDP 的培養(yǎng)液，放入培養(yǎng)箱，這段時間肯定會有小部分細胞懸浮起來，但是不要緊，通過換液可以去掉，下面的細胞待長滿就可以消化傳瓶了，這時可以一直用含藥培養(yǎng)液來消化培養(yǎng)細胞，一兩代之后可以將濃度到 1000ng/ml，含藥培養(yǎng)液用于細胞培養(yǎng)都沒問題的，凍存的時候就不要在凍存液里面加了。(注明：用不含培養(yǎng)基培養(yǎng)一周到兩周，再用含藥培養(yǎng)基培養(yǎng)。)

是否導(dǎo)耐藥基因；否

親本來源；atcc

細胞代數(shù)；10代以內(nèi)

細胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；90% F12K+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

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丙酮酸羧化酶抗體  Anti-PCB    SLU7蛋白抗體  Anti-SLU7

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培養(yǎng)注意事項 ：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。 
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。 
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細胞僅供科研使用。 
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。