
細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟:
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?:
?細(xì)胞接收與記錄?:記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?:定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為,確保細(xì)胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細(xì)胞傳代?:當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代,注意消化時(shí)間和條件,避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?:
?細(xì)胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征,防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?:定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存,確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號(hào) |
A01X656 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
產(chǎn)品分類 |
人細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
英文名稱 |
ARPE-19:ARPE19 |
組織來源 |
眼睛,視網(wǎng)膜 |
商品介紹:
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn))
生長(zhǎng)培養(yǎng)基:
DMEM/F12+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來源文獻(xiàn))
年齡(性別) 男性;19歲
組織來源 眼睛,視網(wǎng)膜
細(xì)胞類型 自發(fā)永生化細(xì)胞
生物等級(jí) BSL-1
倍增時(shí)間 ~55-65 hours
基因表達(dá)情況 RPE-specific markers CRALBP and RPE-65
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2302 BCRC; 60383 BCRJ; 0041
?公司正在出售的產(chǎn)品:
異構(gòu)核糖核蛋白E1抗體 PCBP1
單純皰疹病毒1型DNA聚合酶催化亞單位抗體 HHV11 DNA polymerase catalytic subunit
磷酸化轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激酶1 Anti-Phospho-TAK1(Thr184/187) p21激活激酶4抗體 Anti-PAK4
磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體 Anti-phospho-PKMYT1(Thr495) 磷酸化嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子1抗體 Anti-phospho-NCF1/p47 phox(Ser359)
PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG H&L Rabbit Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy5.5
肽聚糖識(shí)別蛋白1抗體 PGRPS
鋅指蛋白46抗體 Anti-ZBTB25/ZNF46 載脂蛋白AI調(diào)節(jié)蛋白1抗體 Anti-NR2F2/NR2F1
G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體 Anti-RGS2 腦質(zhì)膜單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMAT抗體 Anti-SLC29A4
大鼠c-fos elisa分析檢測(cè)試劑盒 Rat c-fos ELISA Kit
人高敏甲狀腺素(u-T4)elisa分析檢測(cè)試劑盒 u-T4ELISAKit
大鼠Ⅱ型前膠原羧基端原肽(PⅡCP)elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)elisa檢測(cè)試劑盒
昆蟲總蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T 冰凍切片結(jié)締組織(CONNECTIVE TISSUE)改良格莫瑞三色(MGT)染色試劑盒
黑色素瘤相關(guān)抗原E2/肝細(xì)胞癌相關(guān)蛋白3抗體 MAGEE2/HCA3
ARPE-19人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞羰基還原酶2抗體 DCXR
Menin抑癌蛋白抗體 Menin
DNAJC22蛋白抗體 DNAJC22
培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。