細胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	AsPC-1/GEM人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞吉西他濱耐藥株	英文名稱	AsPC-1/GEM:AsPC1GEM
產(chǎn)品貨號	A01X658	培養(yǎng)條件
生長特性	貼壁生長	細胞形態(tài)	上皮細胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	詳見說明
組織來源	ASPC-1耐藥篩選	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細胞介紹

一個胰腺癌病人的腹水中的細胞移植到裸鼠后建立了這個細胞株。

注：本培養(yǎng)基是不直接添加吉西他濱的。如果客戶需要直接添加的我們可以按照客戶的意愿添加吉西他濱。

細胞特性

1）來源：ASPC-1耐藥篩選

2）形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長

3）含量：>1×10?細胞數(shù)             

4）用途：僅供科研使用

核轉(zhuǎn)錄因子κB抑制作用Ras樣2蛋白抗體    NKIRAS2

8號染色體開放閱讀框45抗體    C8orf45

辣椒素受體3抗體  Anti-TRPV3    磷酸化突觸后密度蛋白93抗體  Anti-Phospho-PSD93 (Tyr340)

B細胞白血病前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子3抗體  Anti-PBX3    滑膜肉瘤X染色體相關(guān)2抗體  Anti-SSX2/CT5.2

磷酸化蛋白激酶C theta抗體    phospho-PRKCQ (Ser676)

二肽氨基肽酶3抗體   DPP3

磷酸化賴氨酸缺陷型蛋白激酶1抗體  Anti-Phospho-WNK1(Thr60)    神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體  Anti-Neurotrimin/HNT

環(huán)指蛋白75抗體  Anti-ROC1/RNF75    神經(jīng)肌肉接頭蛋白SNTA1抗體  Anti-Syntrophin/SNTA1/Syntrophin Alpha1

大鼠癌胚抗原(CEA)elisa分析檢測試劑盒    CEA ELISA Kit

人踝蛋白(talin)elisa分析檢測試劑盒    HumantalinELISAKit

小鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa檢測試劑盒    快速SDS-PAGE凝膠配制試劑盒 30-50T

載玻片細胞IGF 蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒    綿羊白介素2(IL-2)elisa分析檢測試劑盒

附睪特異蛋白9抗體    LCN9

AsPC-1/GEM人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞吉西他濱耐藥株β細胞素抗體    Beta cellulin

E3泛素連接酶NEDD4結(jié)合蛋白2抗體    N4BP2

3號染色體開放閱讀框49抗體    C3orf49

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。