商品屬性：

產(chǎn)品名稱	B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞	英文名稱	B16:B16
產(chǎn)品貨號	A01X1031	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	成纖維細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	小鼠	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	黑素瘤	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

注意事項(xiàng) B16系列細(xì)胞，使用DMEM培養(yǎng)時可能出現(xiàn)黑色su快速積累，細(xì)胞不增殖或死亡的情況，該細(xì)胞正常擴(kuò)增凍存請使用RPMI-1640完培，若您需要進(jìn)行分泌黑色su等后續(xù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)，可以在擴(kuò)增凍存細(xì)胞后更換為DMEM培養(yǎng)來滿足實(shí)驗(yàn)設(shè)計。

背景描述 B16細(xì)胞是一株小鼠黑su瘤細(xì)胞。

年齡（性別） 不詳

組織來源 黑su瘤

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 黑色su瘤細(xì)胞

生物等級 1

保藏機(jī)構(gòu) JCRB; JCRB0202 KCB; KCB 93030YJ RCB; RCB1283 TKG; TKG 0144

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

清道夫受體B2抗體 Scavenger Receptor BII    染色質(zhì)修飾蛋白2B抗體 CHMP2B

HAUS8蛋白抗體 HAUS8    INTS5蛋白抗體 INTS5

孕受體單克隆抗體 Progesterone Receptor    著絲粒蛋白36抗體 MSL1v1/CENP36

復(fù)制因子A蛋白2 RPA32    鈣激活鉀通道蛋白β2抗體 KCNMB2

細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體 XBP1    細(xì)胞色素P450 19抗體 Aromatase

TRM11蛋白抗體 TRM11   ZC3H12C蛋白抗體 ZC3H12C

ALDH3A2抗體 ALDH3A2    APC標(biāo)記小鼠CD45.2單克隆抗體 mouse CD45.2/APC

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體 CCDC28A    連接粘附分子1抗體 JAM1

DHPR受體蛋白共沉淀分析試劑盒    葡萄糖氧化酶（GOD）測試盒

核酸蛋白結(jié)合凝膠遷移電泳分析（EMSA）試劑盒    小鼠二肽基肽酶4(DPP4)elisa檢測試劑盒

人表皮生長因子(EGF)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測    12-羥基二十四烯酸（12-HETE）高效液相色譜法定量檢測試劑盒

小鼠抑制素A（INH-A）elisa檢測試劑盒    大鼠硫酸乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)elisa檢測試劑盒

大鼠D-乳酸elisa檢測試劑盒    小鼠磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)elisa檢測試劑盒

B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞人Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)elisa分析檢測試劑盒    通用型血液對氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性比色法定量檢測試劑盒

半椎蛋白2抗體    HMCN2

ABI基因家族2抗體    ABI3