
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
bEnd.3 BEND
產(chǎn)品貨號(hào)
AXB9808
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
小鼠
凍存條件
無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源
腦微血管
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱;bEND.3; b.End3; Bend.3; bEnd3; brain-derived Endothelial cells.3;小鼠微血管內(nèi)皮細(xì)胞
種屬來(lái)源;小鼠
年齡性別;6周齡
組織來(lái)源;腦微血管
生長(zhǎng)特性;貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
背景簡(jiǎn)介;細(xì)胞用表達(dá)多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染進(jìn)行轉(zhuǎn)化。觀察到血管性血友病因子的表達(dá)及對(duì)熒光標(biāo)記的低密度脂蛋白(LDL)的攝入確認(rèn)其內(nèi)皮細(xì)胞特性。bEnd.3 cells細(xì)胞可用細(xì)胞因子和脂多糖(LPS)誘導(dǎo)細(xì)胞的Peyer's結(jié)高內(nèi)皮細(xì)胞受體,粘膜血管定居因子(MAdCAM-1) 及內(nèi)皮細(xì)胞選擇素的表達(dá)。腫瘤壞死因子 a (TNF alpha), 白介素 1 (IL-1)或 LPS的誘導(dǎo)作用是濃度及時(shí)間依賴的。
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
背景介紹;Bend.3細(xì)胞轉(zhuǎn)染了表達(dá)多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。
生物等級(jí);1
細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè);無(wú)
保藏機(jī)構(gòu);ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515 ECACC; 96091929
培養(yǎng)基;90%DMEM+10%FBS+PS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體 PCK1
CBX7蛋白抗體 CBX7
磷酸化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體 Anti-phospho-TNIK(Ser769) 內(nèi)脂素/前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子-2(C端抗體) Anti-PBEF (CT)
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK5A蛋白抗體 Anti-PDZD5A/FRMPD2L2 管內(nèi)皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞受體1抗體 Anti-stabilin1/STAB 1
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgG H&L Rabbit Anti-Horse IgG H&L / PE-Cy7
EHD4蛋白抗體 EHD4
鋅指FYVE結(jié)構(gòu)域蛋白27抗體 Anti-ZFYVE27 利鈉肽受體B抗體 Anti-Natriuretic Peptide Receptor B
細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體(復(fù)制因子C) Anti-Rad17/RFC 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 Anti-phospho-c-Abl(Ser569)
大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)elisa分析檢測(cè)試劑盒 8-OHdG ELISA Kit
人甘露糖(Mannose)elisa分析檢測(cè)試劑盒 HumanMannoseELISAKit
大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè) 石蠟切片組織衰老特異性早期脂褐素油性紅原位直接染色試劑盒
兔膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CHAT)elisa檢測(cè)試劑盒 肉類抗壞血酸比色法定量檢測(cè)試劑盒
MCCC1蛋白抗體 MCCC1
bEnd.3 [BEND3](小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株)19號(hào)染色體開放閱讀框48抗體 C19orf48
Fas相互作用蛋白激酶3抗體 HIPK3
擬南芥ACA11抗體 ACA11