商品屬性：

產(chǎn)品名稱	bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株	英文名稱	bEnd.3:bEnd3
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X1036	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%,
生長特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	小鼠	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	大腦皮層	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）

生長培養(yǎng)基:

DMEM＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

注意事項(xiàng) 1.該細(xì)胞在低密度下形態(tài)不規(guī)則，細(xì)胞數(shù)量少，鋪展面積大，高密度后形態(tài)會(huì)趨于一致，胞體密集；2.細(xì)胞增殖偏慢，初次傳代建議1:2，細(xì)胞穩(wěn)定后建議傳代比例也不超過1:4；3.注意觀察培養(yǎng)基顏色，顏色偏紫會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞漂浮增加；4.消化時(shí)間會(huì)隨著細(xì)胞生長時(shí)間和細(xì)胞密度而有所不同，需要結(jié)合消化時(shí)細(xì)胞狀態(tài)來判斷，消化到細(xì)胞可以滑落方可終止。

參考資料(來源文獻(xiàn))

背景描述 The cells were transformed by infection with the NTKmT retrovirus vector that expresses polyomavirus middle T antigen

年齡（性別） 6周齡

組織來源 大腦皮層

細(xì)胞類型 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系

生物等級(jí) BSL-1

抗原表達(dá)情況 ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 +

基因表達(dá)情況 von Willebrand factor,ICAM-1 +; VCAM-1 +; MAdCAM-1 +,The endothelial nature of these cells was confirmed by the observed expression of von Willebrand factor and uptake of fluorescently labeled low density lipoprotein (LDL).,The expression of Peyer's Patch high endothelial receptor for lymphocytes, the mucosal vascular addressin (MAdCAM-1) and E-selectin can be induced on bEnd

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2299 BCRC; 60515 ECACC; 96091929

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

軸突生長誘向因子4抗體    Netrin 4

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7號(hào)染色體開放閱讀框10抗體    C7orf10

硫氧還蛋白5抗體  Anti-TXNDC5    抑制素/腫瘤抑制因子抗體  Anti-Prohibitin

癌調(diào)蛋白/癌鈣蛋白抗體  Anti-oncomodulin/OCM    血清淀粉樣蛋白4抗體  Anti-SAA4/Serum amyloid A 4 protein

磷酸化整合素β3/CD61抗體    phospho-ITGB3 (Tyr773)

DNAJC15抗體   DNAJC15

囊泡乙酰膽堿通道抗體  Anti-VAT    核小體結(jié)合蛋白1抗體  Anti-NSBP1

Rap鳥嘌呤核苷酸交換因子(GEF)5抗體  Anti-RAPGEF5/Repac    T細(xì)胞活化連接蛋白抗體  Anti-LAT

大鼠白介素6受體(IL-6R)elisa分析檢測試劑盒    IL-6R ELISA Kit

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小鼠球蛋白D(IgD)elisa分析檢測試劑盒    大鼠肝素結(jié)合性表皮生長因子(HBEGF)elisa檢測試劑盒

KRBOX1蛋白抗體    KRBOX1

bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白10抗體    BBS10

環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa分析檢測試劑盒    cGMP ELISA Kit

人帶3蛋白(Band3)elisa分析檢測試劑盒    HumanBand3proteinELISAkit