細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	BICR 22人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞	英文名稱	BICR 22
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB6144	培養(yǎng)條件	DMEM + 2mM Glutamine + 2% Foetal Bovine Serum (FBS) + 0.4 micrograms/ml Hydrocortisone37 ℃, 5% CO2
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮，角質(zhì)形成細(xì)胞
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	90% FBS + 10% DMSO
組織來(lái)源	舌	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

種屬來(lái)源；人

組織來(lái)源；舌

性別年齡；男性，88歲

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮，角質(zhì)形成細(xì)胞

細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件；DMEM + 2mM Glutamine + 2% Foetal Bovine Serum (FBS) + 0.4 micrograms/ml Hydrocortisone37 ℃, 5% CO2

凍存條件；90% FBS + 10% DMSO

傳代方法；1:3傳代, 2-3天傳1代

原鈣粘蛋白β7抗體    PCDHB7

艾滋病病毒Nef抗體    HIV1 Nef

磷酸化酪氨酸羥化酶抗體  Anti-Phospho-TH (Ser31)    絲裂原活化蛋白激酶p38α抗體  Anti-p38MAPK/MAPK14/p38Alpha

過(guò)氧化酶活化增生受體γ2抗體  Anti-PPAR gamma 2    突觸相關(guān)蛋白29抗體  Anti-SNAP29

Cy7標(biāo)記的兔抗狗IgG H&L    Rabbit Anti-Dog IgG H&L / Cy7

磷酸化自噬相關(guān)蛋白4A抗體   phospho-ATG4A (Ser100)

鋅指蛋白23抗體  Anti-ZNF23    絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Nek3抗體  Anti-NEK3

乳腺癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體  Anti-RAD51C    溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1抗體  Anti-SLC44A1/CD92

大鼠B細(xì)胞κ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(NFKBIE)elisa分析檢測(cè)試劑盒    Rat NFKBIE ELISA Kit

人肝素-血小板因子4復(fù)合物抗體(IgG)elisa分析檢測(cè)試劑盒    HumanHeparin-Plateletfactor4ComplexantibodyIgGELISAKit

大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)    鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

人蛋白 DJ-1(PARK7)elisa檢測(cè)試劑盒    通用型HSV1（HERPES SIMPLX1）病毒定性檢測(cè)試劑盒

MARVEL蛋白家族D2抗體    MARVELD2

BICR 22人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞橋粒芯糖蛋白4抗體    Desmoglein 4

魚(yú)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFB1)elisa分析檢測(cè)試劑盒    TGFB1 ELISA kit

人雌(E)elisa分析檢測(cè)試劑盒    EELISAKit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。