細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	BICR 6人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞	英文名稱	BICR 6
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB6148	培養(yǎng)條件	DMEM + 2mM Glutamine + 10% Foetal Bovine Serum (FBS) + 0.4 μg/ml Hydrocortisone37 ℃, 5% CO2
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮，角質(zhì)形成細(xì)胞
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	90% FBS + 10% DMSO
組織來(lái)源	下咽	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

種屬來(lái)源；人

組織來(lái)源；下咽

性別年齡；男性

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮，角質(zhì)形成細(xì)胞

細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件；DMEM + 2mM Glutamine + 10% Foetal Bovine Serum (FBS) + 0.4 μg/ml Hydrocortisone37 ℃, 5% CO2

凍存條件；90% FBS + 10% DMSO

傳代方法；3-4天傳1代

核受體輔助抑制因子2抗體    NCoR2

細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FREM1抗體    FREM1

胸腺素β4抗體  Anti-Thymosin beta 4    組蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶CARM1抗體  Anti-PRMT4

精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白Oligophrenin-1抗體  Anti-Oligophrenin 1    鉀依賴鈉鈣交換蛋白6抗體  Anti-SLC6A19

螺旋環(huán)螺旋轉(zhuǎn)錄因子HATH6抗體    Protein atonal homolog 8

神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體   NRG4

腦特異性鈉依賴無(wú)機(jī)磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體  Anti-VGLUT1/BNP1    中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體  Anti-NF-M/Neurofilament M

RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AB7抗體  Anti-RAB7    腫瘤相關(guān)抗原L6抗體  Anti-TAAL6/Transmembrane 4 L6 family member 1

大鼠不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)elisa分析檢測(cè)試劑盒    ADMA ELISA Kit

人甲基化CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)elisa分析檢測(cè)試劑盒    MECP2ELISAKit

大鼠血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)elisa檢測(cè)試劑盒    豬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)elisa檢測(cè)試劑盒

人膀胱腫瘤抗原(BTA)elisa檢測(cè)試劑盒    糖果D-葡萄糖氧化法定量檢測(cè)試劑盒

KIF20A抗體    KIF20A

BICR 6人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞染色質(zhì)修飾蛋白CHMP6抗體    CHMP6

Neuromedin-C抗體    Neuromedin-C

7號(hào)染色體開放閱讀框26抗體    C7orf26

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。