細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品貨號	AXB6159	凍存條件	90% FBS + 10% DMSO
產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系	產(chǎn)品種屬	人
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
英文名稱	C2BBe1	組織來源	結(jié)腸

商品詳情：

種屬來源；人

組織來源；結(jié)腸

性別年齡；男性

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件；DMEM+10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

凍存條件；90% FBS + 10% DMSO

傳代方法；1:3傳代, 2-3天傳1代

通用轉(zhuǎn)錄因子3A       GTF3A

tRNA剪接內(nèi)切酶2抗體  Anti-TSEN2       凋亡相關(guān)蛋白4抗體  Anti-PDCD4

背板膠質(zhì)乙酰酯酶抗體       NOTUM

磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體       Phospho-Rb (Ser608)

X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白4抗體  Anti-XRCC4       核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體  Anti-NUSAP1

磷酸化蛋白激酶C抗體  Anti-phospho-PRKCA(Thr637)       細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體  Anti-SPON2/M spondin/Mindin

嗅覺受體5D13抗體      OR5D13

RFESD蛋白抗體  Anti-RFESD       PSD95結(jié)合蛋白2抗體  Anti-SAPAP2/DLGAP2人核糖核酸酶,核糖核酸酶A家族,(肝臟,嗜酸性粒細(xì)胞源性神經(jīng))(RNASE2)elisa分析檢測試劑盒       HumanRNASE2ELISAkit

8號染色體開放閱讀框37抗體       C8orf37

大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa分析檢測試劑盒       β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit

小鼠游離睪酮(F-TESTO)elisa檢測試劑盒       大鼠饑餓(GHRL)elisa檢測試劑盒

細(xì)胞ROCK-I激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）       人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白(LUM)elisa分析檢測試劑盒

LIN7A蛋白抗體       LIN7A

C2BBe1 人結(jié)腸癌細(xì)胞細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64T抗體       CSTF2T

膜相關(guān)磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體       NIR1

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。