
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
C3H/10T1/2 Clone8 :C3H10T12 Clone8
產(chǎn)品貨號(hào)
A01X1041
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
小鼠
凍存條件
無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
組織來源
胚胎
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞別稱:C3H/10T1/2-clone8; C3H/10T1/2 CL8; C3H10T1/2CL8; 10T1/2; C3H10T1-2; C3H10T1/2; C3H-10T1/2; C3H 10T1/2; C3H/10T1/2
種屬來源:小鼠
年齡性別:胚胎
組織來源:胚胎
生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
背景簡(jiǎn)介:1C3H/10T1/2, Clone 8細(xì)胞是由C·Reznikoff等人于1972從C3H系小鼠胚胎細(xì)胞分離。C3H/10T1/2, Clone 8細(xì)胞對(duì)過度長(zhǎng)滿的細(xì)胞有絲分裂抑制非常敏感,在同源小鼠中不產(chǎn)生腫瘤,無自然轉(zhuǎn)化的背景;C3H/10T1/2, Clone 8細(xì)胞也不含明顯內(nèi)源性轉(zhuǎn)化鼠類白血病或肉瘤病毒。
生物等級(jí):1
細(xì)胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè):無
基因表達(dá)情況:
保藏機(jī)構(gòu):ATCC; CCL-226 ECACC; 99072801
培養(yǎng)基:MEM+10% FBS+PS+2mM L-glutamine
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

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磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白1抗體 Anti-RKIP/PBP 硫酸酯酶修飾因子1抗體 Anti-SUMF1人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)elisa分析檢測(cè)試劑盒 HumanCNR-1ELISAKit
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草酸含量試劑盒 冰凍切片組織COLLAGEN I蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
小鼠白三烯B4(LTB4)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè) 大鼠60kD熱休克蛋白(HSPD1)elisa檢測(cè)試劑盒
MED30蛋白抗體 MED30
C3H/10T1/2 Clone8 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞1號(hào)染色體開放閱讀框110抗體 C1orf110
甲狀腺受體相互作用蛋白8抗體 JMJD1C