
細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟:
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細(xì)胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?:
?細(xì)胞接收與記錄?:記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?:定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為,確保細(xì)胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細(xì)胞傳代?:當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代,注意消化時(shí)間和條件,避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?:
?細(xì)胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征,防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?:定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存,確保細(xì)胞的長期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號(hào) |
AXB9823 |
凍存條件 |
無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
產(chǎn)品分類 |
人細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
英文名稱 |
HEK |
組織來源 |
胚胎腎 |
商品介紹:
細(xì)胞別稱;Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293
種屬來源;人
年齡性別;胎兒
組織來源;胚胎腎
生長特性;貼壁生長
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
背景簡介;293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,293 [HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出,293 [HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點(diǎn)的克隆測序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主,可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。
STR位點(diǎn);Amelogenin:X;CSF1PO:7,12;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:15,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;
特別注意;該細(xì)胞貼壁不牢,運(yùn)輸過程中細(xì)胞會(huì)有脫落,如細(xì)胞脫落,請離心收集,消化后重新鋪瓶
生物等級(jí);2
細(xì)胞規(guī)格;1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測;無
保藏機(jī)構(gòu);ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602
培養(yǎng)基;90% MEM+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
?公司正在出售的產(chǎn)品:
EXOD1蛋白抗體 EXOD1 FAM90A1蛋白抗體 FAM90A1
鋅指轉(zhuǎn)錄抑制因子KLF12抗體 KLF12 嗅覺受體5D16抗體 OR5D16
磷酸神經(jīng)膜抗體 FXYD1 單克隆抗體 Ketamine(4E2)
絲氨酸蛋白酶14/膜型絲氨酸蛋白酶1抗體 ST14 酸性磷酸酶樣蛋白2抗體 ACPL2
19號(hào)染色體開放閱讀框28抗體 C19orf28 20號(hào)染色體開放閱讀框196抗體 C20orf196
大腸桿菌耐熱性腸抗體 heatstable enterotoxin 1 蛋白激酶PKR抑制蛋白PRKRIR抗體 PRKRIR
PE標(biāo)記人CD45RO單克隆抗體 human CD45RO/PE PSD4蛋白抗體 PSD4
黃素腺嘌呤二核苷酸抗體 FLAD1 病毒受體相關(guān)蛋白4抗體 Nectin 4植物類黃酮測試盒 胱硫醚-β-裂解酶(cystathionine β-lyase;CBL)活性比色法定量檢測試劑盒
19號(hào)染色體開放閱讀框24抗體 C19orf24
大鼠白血病抑制因子(LIF)elisa檢測試劑盒 小鼠抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)elisa檢測試劑盒
豬Syndecan-1/CD138(SDC1)elisa檢測試劑盒 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞砷元素比色法定量檢測試劑盒 小鼠B-細(xì)胞κ-輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子激酶β(IκBKβ)elisa檢測試劑盒
人腸三葉因子(ITF)elisa分析檢測試劑盒 血液總酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
HEK-293(人胚腎細(xì)胞)小鼠心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)elisa檢測試劑盒 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)elisa分析檢測試劑盒
MARCKS樣蛋白1抗體 MARCKSL1
培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。