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商品屬性:
產(chǎn)品貨號(hào) |
A01X744 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
產(chǎn)品分類(lèi) |
人細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
英文名稱(chēng) |
HEK-293A:HEK293A |
組織來(lái)源 |
腎;以腺病毒5DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化 |
商品介紹:
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn))
生長(zhǎng)培養(yǎng)基:
MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
注意事項(xiàng) 該細(xì)胞貼壁松散,操作時(shí)請(qǐng)盡量輕柔;換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán),為正?,F(xiàn)象,請(qǐng)按照收貨注意事項(xiàng)處理。
參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))
背景描述 293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過(guò)的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,293 [HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出,293 [HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過(guò)對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線(xiàn)性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類(lèi)腺病毒載體擴(kuò)增的宿主,可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。
年齡(性別) 胎兒
組織來(lái)源 腎;以腺病毒5DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化
細(xì)胞類(lèi)型 轉(zhuǎn)化細(xì)胞系
生物等級(jí) BSL-2
倍增時(shí)間 ~24-30 hours
致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice.
受體表達(dá)情況 vitronectin
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1573 ATCC: PTA-4488 DSMZ: ACC-305 ECACC: 85120602
培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
1. 收到細(xì)胞后首先觀(guān)察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,責(zé)任由 客戶(hù)自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀(guān)察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪(fǎng)直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。
細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟:
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過(guò)紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程?:
?細(xì)胞接收與記錄?:記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀(guān)察?:定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為,確保細(xì)胞狀態(tài)健康,無(wú)污染?。
?細(xì)胞傳代?:當(dāng)細(xì)胞密度超過(guò)80%時(shí)進(jìn)行傳代,注意消化時(shí)間和條件,避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?:
?細(xì)胞系鑒定?:通過(guò)STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征,防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?:定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存,確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。
?公司正在出售的產(chǎn)品:
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細(xì)胞色素P450 4V2抗體 CYP4V2
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