細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟：

?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?：
?生物柜的使用?：確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外，防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?：提供細(xì)胞生長的環(huán)境，保持恒定的溫度（通常為37℃）?。
?培養(yǎng)基和血清?：特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì)，如糖、氨基酸和維生素，添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?：
?細(xì)胞接收與記錄?：記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息，包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?：定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為，確保細(xì)胞狀態(tài)健康，無污染?。
?細(xì)胞傳代?：當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代，注意消化時(shí)間和條件，避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?：
?細(xì)胞系鑒定?：通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征，防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?：定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存，確保細(xì)胞的長期存活和可用性?。

本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

商品屬性：

產(chǎn)品貨號	A01X752	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系	產(chǎn)品種屬	人
生長特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
英文名稱	Hep3B2.1-7 [Hep3B] :Hep3B217 Hep3B	組織來源	肝細(xì)胞癌，肝

商品介紹：

生長特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）

生長培養(yǎng)基:

MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:3

推薦換液頻率 2-3次/周

參考資料(來源文獻(xiàn))

背景描述 Hep 3B2.1-7細(xì)胞是來自8歲男性黑人的組織。Hep 3B2.1-7細(xì)胞的染色體模式數(shù)目為60，在裸鼠中能致瘤。Hep 3B2.1-7細(xì)胞整合了完整的乙型肝炎病毒基因組，需在2級生物防護(hù)下操作。

年齡（性別） 男性；8歲

組織來源 肝細(xì)胞癌，肝

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 肝膽癌細(xì)胞

生物等級 BSL-2

倍增時(shí)間 ~40-50 hours

致瘤性 Yes, in nude mice.

基因表達(dá)情況 alpha fetoprotein (alpha-fetoprotein); hepatitis B surface antigen (HBsAg); albumin; alpha2 macroglobulin (alpha-2-macroglobulin); alpha1 antitrypsin (alpha-1-antitrypsin); transferrin;, alpha1 antichymotrypsin (alpha-1-antichymotrypsin); haptoglobin; ceruloplasmin; plasminogen; complement (C3, C4); C3 activator; fibrinogen; alpha1 acid glycoprotein (alpha-1 acid glycoprotein);, alpha2 HS glycoprotein (alpha-2-HS-glycoprotein); beta lipoprotein (beta-lipoprotein); retinol binding protein (retinol-

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HB-8064 BCRC; 60434 BCRJ; 0357 DSMZ; ACC-93 ECACC; 86062703

?公司正在出售的產(chǎn)品：

Ras蛋白特異鳥嘌呤核苷酸釋放因子3抗體 RASGRP3       RNA尿苷酸合酶結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 RPUSD2

4號染色體開放閱讀框22抗體 C4orf22       7號染色體開放閱讀框72抗體 C7orf72

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氧化低密度脂蛋白單克隆抗體 ox-LDL       乙肝病毒衣殼蛋白抗體 HBcAg

FKBP135蛋白抗體 FKBP135       GDP甘露糖焦磷酸化酶B抗體 GMPPB

激肽釋放酶抑制劑抗體 KLST/Kallistatin       甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-2抗體 FOXE1

動(dòng)力蛋白激活蛋白亞基3抗體 DCTN3      耳蝸蛋白OTOS抗體 OTOS

錨蛋白重復(fù)域54抗體 ANKRD54       腦啡肽受體/ζ受體抗體 Zeta Opioid Receptor大鼠可溶性白介素-2 受體(sIL-2R)elisa分析檢測試劑盒       組織5’－核苷酸酶（5’－NT）活性比色法定量檢測試劑盒

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大鼠Podocin蛋白(PDCN)elisa檢測試劑盒       小鼠芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子(ARNT)elisa檢測試劑盒

小鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶1(IDO1)elisa檢測試劑盒       大鼠絡(luò)絲蛋白(RL)elisa檢測試劑盒

NE高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒       土壤速效氮測試盒

人α1抗胰蛋白酶(α1-AT)elisa分析檢測試劑盒       組織樣品組織B（CATHEPSIN B）活性熒光定量檢測試劑盒

Hep3B2.1-7 [Hep3B] 人肝癌細(xì)胞小鼠卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3)elisa檢測試劑盒       大鼠甘露糖寡糖1,2-α-甘露糖苷酶IA(MAN1A1)elisa檢測試劑盒

FRMD6蛋白抗體 FRMD6       G氨基丁酸A型受體rho1/GABAA Rρ1抗體 GABRR1

培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。