細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	HEPA1-6小鼠肝癌細(xì)胞	英文名稱	HEPA1-6:HEPA16
產(chǎn)品貨號	A01X1057	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	小鼠	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	肝臟	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱：hepa 1-6; Hepa1-6；小鼠肝癌細(xì)胞

種屬來源：小鼠

年齡性別：

組織來源：肝臟

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡介：Hepa 1-6細(xì)胞是C57/L小鼠中產(chǎn)生的BW7756小鼠肝癌的衍生株。檢測表明鼠痘病毒（ectromelia virus，ECTV）陰性

生物等級：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達(dá)情況：albumin, alpha fetoprotein (AFP, alpha-fetoprotein); albumin; alpha 1 antitrypsin (alpha-1-antitrypsin); amylase

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-1830 BCRC; 60051 DSMZ; ACC-175 ECACC; 92110305

培養(yǎng)基：90%DMEM+10%FBS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

倍增時(shí)間：~24-30小時(shí)

補(bǔ)體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白5抗體 CTRP5       成纖維細(xì)胞激活蛋白α重組兔單克隆抗體 FAP

DNA聚合酶δ催化亞單位/DNA pol δ cat抗體 DNA Polymerase delta, catalytic subunit       EDEM3蛋白抗體 EDEM3

鋅指蛋白350/乳腺癌易感基因1結(jié)合蛋白抗體 ZNF350       鋅指蛋白737抗體 ZNF737

自噬相關(guān)蛋白4C抗體 ATG4C       組織蛋白酶H輕連抗體 Cathepsin H light chain

P5C還原酶1抗體 PYCR1       PE-Cy7標(biāo)記人CD2單克隆抗體 human CD2/PE-Cy7

磷酸化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體 phospho-CDC27 (Thr244)       磷酸化上皮鈉通道β2抗體 phospho-SCNN1B (Thr615)

核纖層蛋白B重組兔單克隆抗體 Lamin B1      互養(yǎng)蛋白3抗體 SNTB2/Syntrophin-3

神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2抗體 NRG2       視網(wǎng)膜前神經(jīng)折疊源框蛋白抗體 RAXL1蛋白電泳伊紅黃色染色試劑盒       小鼠甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)elisa檢測試劑盒

鈣營養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體       Calneuron 1

冰凍切片組織K（CATHEPSIN K）活性原位熒光染色檢測試劑盒       雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)elisa分析檢測試劑盒

人層粘連蛋白β1(LN-β1)elisa檢測試劑盒       PH9-10顯色（THYMOLPHTHALEIN）指示溶液

小鼠脂多糖/內(nèi)(LPS)elisa檢測試劑盒       大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶1(ECE1)elisa檢測試劑盒

大鼠白介素15(IL-15)elisa檢測試劑盒       小鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測

HEPA1-6小鼠肝癌細(xì)胞人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)elisa分析檢測試劑盒       組織（PROTEASE）活性比色法定量檢測試劑盒

木瓜酶抗體       Papain

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。