商品屬性：

產(chǎn)品名稱	HT-29 (HT29)人結(jié)腸癌細(xì)胞	英文名稱	HT-29 (HT29):HT29 HT29
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X777	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%,
生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來(lái)源	結(jié)直腸腺癌	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）

生長(zhǎng)培養(yǎng)基:

McCoy’s 5A＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

參考資料(來(lái)源文獻(xiàn))

背景描述 HT-29細(xì)胞是由J·Fogh在1964年用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的；近來(lái)，已建株的培養(yǎng)細(xì)胞用含相同血清McCoy's5A培液培養(yǎng)。HT-29細(xì)胞在裸鼠中致瘤，也能在類固醇處理的地鼠中致瘤。HT-29細(xì)胞合成IgA、CEA、蛋白綁定TGF-β的分泌成分和粘液素等。

年齡（性別） 女性；44歲

組織來(lái)源 結(jié)直腸腺癌

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 腸癌細(xì)胞

生物等級(jí) BSL-1

倍增時(shí)間 ~36-60 hours

致瘤性 Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.

受體表達(dá)情況 human adrenergic alpha2A, urokinase receptor (u-PAR), vitamin D (moderate expression), urokinase receptor (u-PAR); vitamin D (moderate expression), human adrenergic alpha2A

基因表達(dá)情況 secretory component of IgA; carcinoembryonic antigen (CEA); transforming growth factor beta binding protein; mucin, myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV).

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-38 BCRJ; 0111 CCLV; CCLV-RIE 0960 DSMZ; ACC-299 ECACC; 91072201

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

AF750標(biāo)記的ADCK1蛋白抗體 ADCK1, Alexa Flour 750 conjugated       APC-Cy5.5標(biāo)記小鼠CD45R單克隆抗體 mouse CD45R/APC-Cy5.5

硒結(jié)合蛋白1抗體 Selenium Binding Protein 1       細(xì)胞角蛋白19，17，14，42，10抗體

顆粒溶素抗體 GNLY       辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的脫氧核糖核酸酶γ抗體 DNase gamma, HRP conjugated

清道夫受體B1+B2抗體 Scavenger Receptor BI + BII       染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體 CHMP1B

孕受體β（MPRβ）抗體 Progestin Receptor Beta       著絲粒ZWILCH蛋白抗體 ZWILCH

TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子1樣蛋白抗體 TAF1L       T細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體 PHLDA1

HAUS5蛋白抗體 HAUS5      INTS4蛋白抗體 INTS4

復(fù)制激活因子C2抗體 RFC2       鈣依賴膜結(jié)合蛋白Copine蛋白7抗體 CPNE7環(huán)境副傷A（Salmonella Paratyphi A）定性基因檢測(cè)試劑盒       小鼠γ氨基丁酸(GABA)自身抗體IgG elisa分析檢測(cè)試劑盒

APS抗體       APS

冰凍切片組織ER BETA 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒       大鼠整合素α2+β1(ITGA2+ITGB1)elisa檢測(cè)試劑盒

人EB病毒衣殼抗原(EBVCA)抗體(IgG)elisa檢測(cè)試劑盒       組織CASEIN KINASE 1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

小鼠去甲腎上腺素(NA)elisa分析檢測(cè)試劑盒       大鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨酸激酶1(Tie-1)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)elisa分析檢測(cè)試劑盒       小鼠過(guò)氧化氫酶(CAT)elisa檢測(cè)試劑盒

HT-29 (HT29)人結(jié)腸癌細(xì)胞昆蟲總蛋白提取試劑盒（2D電泳用）100T       石蠟切片結(jié)締組織（CONNECTIVE TISSUE）改良格莫瑞三色（MGT） 染色試劑盒

K1826蛋白抗體       K1826