商品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	hTERT-HPNE（人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞）	英文名稱(chēng)	hTERT-HPNE
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB9834	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源	胰腺	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱(chēng)；hTERT-HPNE；人胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞

種屬來(lái)源；人

組織來(lái)源；胰腺

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；hTERT- hpne細(xì)胞系是通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體(逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體pBABEpuro)轉(zhuǎn)導(dǎo)人胰管產(chǎn)生的，該載體含有hTERT基因。受感染的細(xì)胞端粒酶呈陽(yáng)性，但未衰老，在Ref的文獻(xiàn)中傳代150多次后仍在增殖。

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)；無(wú)

培養(yǎng)基；70.5%DMEM（無(wú)糖）+23.5% Medium M3+5%FBS+10ng/ml重組人表皮生長(zhǎng)因子EGF+750ng/ml嘌呤霉素+2.5g/L  D-葡萄糖+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框59抗體       C8ORF59

酒類(lèi)L－蘋(píng)果酸比色法定量檢測(cè)試劑盒       小鼠Klotho elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白IPP抗體       IPP

ras癌基因家族Rab2抗體       RAB2

泛素載體蛋白L6抗體  Anti-Ube2L6       絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PIM3抗體  Anti-PIM3

大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)elisa檢測(cè)試劑盒       載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

鐵反應(yīng)元件結(jié)合蛋白2抗體      IREB2

磷酸化蛋白磷酸酶2A（PP2Aα）抗體  Anti-phospho-PP2A alpha(Tyr307)       促黃體誘導(dǎo)蛋白5抗體  Anti-STARD5FUT9蛋白抗體       FUT9

腺相關(guān)病毒5抗體       AAV5 capsid VP2 protein

Cy7標(biāo)記的驢抗人IgG H&L       Donkey Anti-Human IgG H&L / Cy7

牛血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3)elisa分析檢測(cè)試劑盒       VEGFR-3 ELISA kit

小鼠谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)elisa分析檢測(cè)試劑盒       GDH/GLDHELISAKit

倉(cāng)鼠谷胱甘肽過(guò)氧化物酶3(GPX3)elisa分析檢測(cè)試劑盒       GPX3 ELISA kit

hTERT-HPNE（人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞）人凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)elisa分析檢測(cè)試劑盒       HumanBIRC4ELISAkit

癌基因HKR1抗體       HKR1