
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
IOSE-80:IOSE80
產(chǎn)品貨號(hào)
A01X793
培養(yǎng)條件
生長特性
貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
詳見說明
組織來源
人卵巢
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
細(xì)胞特性
1)來源:人卵巢
2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長
3)含量:>1x106細(xì)胞數(shù)
4)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5)用途:僅供科研使用。

公司正在出售的產(chǎn)品:

AF750標(biāo)記的磷酸化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1抗體 Phospho-TAK1(Thr184 + Thr187), Alexa Fluor 750 conjugated APC標(biāo)記人CD18單克隆抗體 human CD18/APC
細(xì)胞分化周期CDC42相互作用蛋白4抗體 Cip4 細(xì)胞膜鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶抗體 PMCA2
跨膜蛋白179抗體 TMEM179 酪氨酸蛋白激酶細(xì)胞分裂素抗體 MATK
趨化素樣因子超家族成員6抗體 CKLFH6 熱休克蛋白家族40抗體 HSP40
早期未分化視網(wǎng)膜及晶狀體蛋白EURL抗體 TSPEAR 整合素α7抗體 ITGA7
Toll樣受體銜接蛋白TICAM2抗體 TICAM2 VSV-G tag標(biāo)簽抗體 VSV-G tag
HIGD2B蛋白抗體 HIGD2B JRK蛋白抗體 JRK
富含亮氨酸重復(fù)蛋白51抗體 LRTOMT/LRRC51 干擾素調(diào)節(jié)因子6抗體 IRF6大鼠腺病毒(ADV)抗體(IgG)elisa檢測試劑盒 PAR-2蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體IgG(HSVⅡ-Ab)elisa分析檢測試劑盒 HSVⅡ-AbELISAKit
Ran鳥苷酸酶活性分析試劑盒 小鼠CD33分子(CD33)elisa分析檢測試劑盒
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)elisa檢測試劑盒 大鼠多功能肽酶2(LMP2)elisa檢測試劑盒
組織硫氧還蛋白還原酶2(mito thioredoxin reductase 2)活性比色法定量檢測試劑盒 人單純皰疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒
TB培養(yǎng)基Terrific Broth 250g (含AP一抗)
IOSE-80人正常卵巢上皮細(xì)胞系小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)elisa分析檢測試劑盒 大鼠III型前膠原肽(PIIINP)elisa檢測試劑盒
鴿子5羥色胺(5-HT)elisa分析檢測試劑盒 5HT ELISA Kit
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。