
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
J82:J82
產(chǎn)品貨號
A01X795
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
生長特性
貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源
器官:膀胱;:移行細(xì)胞癌
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
生長培養(yǎng)基 MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 J82細(xì)胞源自一名58歲患有膀胱移行細(xì)胞癌的白人男性。J82細(xì)胞內(nèi)無橋粒,有大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及突出絨毛,可表達(dá)ras基因。
年齡(性別) 男;58歲
組織來源 器官:膀胱;:移行細(xì)胞癌
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 膀胱癌細(xì)胞
生物等級 1
致瘤性 Yes, in nude mice.
抗原表達(dá)情況 HLA A2, Aw32, B5, B12, Cw5; Blood Type A
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-1

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

G氨基丁酸受體γ3/GABAA Rγ3抗體 GABRG3 G蛋白偶聯(lián)受體GPR110蛋白抗體 GPR110
異染色體源蛋白1抗體 CBX1 原癌基因M-ras抗體 MRas
扭轉(zhuǎn)原腸胚形成源蛋白1抗體 TWSG1 前列腺素F2a受體抗體PGF2αR PTGFR
微管相關(guān)蛋白抗體 Tau 細(xì)胞表面趨化因子受體7重組兔單克隆抗體 CCR7
AF680標(biāo)記的DNA修復(fù)蛋白Rad50抗體 RAD50, Alexa Fluor 680 conjugated AF750標(biāo)記的孤兒核受體蛋白Nur77抗體 Nur77, Alexa Fluor 750 conjugated
泛素蛋白連接酶L3抗體 Ube2L3 肥大細(xì)胞類胰蛋白酶重組兔單克隆抗體 Mast Cell Tryptase
SIDT1蛋白抗體 SIDT1 TIGD1蛋白抗體 TIGD1
拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子重組兔單克隆抗體 AATF 跨膜蛋白204抗體 TMEM204通用型亮(leucine)含量比色法定量檢測試劑盒 小鼠半乳凝素4(GAL4)elisa檢測試劑盒
肺α/β水解酶蛋白3抗體 ABHD3
CREB蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒 動物組織/細(xì)胞RNA提取試劑盒 50次
人Z-DNA結(jié)合蛋白1(ZBP1)elisa分析檢測試劑盒 細(xì)胞糖原磷酸化酶a(GLYCOGEN PHOSPHORYLASE)活性
小鼠碳酸酐酶2(CA-2)elisa檢測試劑盒 大鼠降鈣素原(PCT)elisa檢測試劑盒
植物中脂氧合酶 (LOX)測試盒 小鼠甲狀腺球蛋白(TG)elisa檢測試劑盒
J82人膀胱移行細(xì)胞癌膜蛋白提取試劑盒(2D電泳用)50T 植物還原型甘肽(GSH)濃度高效液相色譜定量檢測試劑盒
組織相容性抗原DQA2抗體 HLA-DQA2