細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞	英文名稱	JEG-3:JEG3
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X798	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	胎盤病變；絨毛膜癌	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 JEG-3細(xì)胞是一株超三倍體人類細(xì)胞株。JEG-3細(xì)胞的典型染色體數(shù)為71，發(fā)生率為34%，多倍體率為2.6%。t(4;11)(p15;q13)，i(13q)，t(10p15q)，del(18)(q21)和6個(gè)其他標(biāo)記在大多數(shù)細(xì)胞中常見，另有兩個(gè)標(biāo)記在一些細(xì)胞中可見，在一個(gè)N14和兩個(gè)N22中可見大衛(wèi)星。N2、N5和N9有4個(gè)拷貝，而N7、N13、N18、N21和X為單拷貝，Q-帶檢測(cè)法可以檢測(cè)到單個(gè)Y染色體。

年齡（性別） 男

組織來源 胎盤病變；絨毛膜癌

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 其它腫瘤細(xì)胞

生物等級(jí) 1

倍增時(shí)間 ~24-36 hours

致瘤性 Yes, in nude mice; forms malignant tumor consistent with choriocarcinoma.

基因表達(dá)情況 human chorionic gonadotropin (hCG), human chorionic somatomammotropin (placental lactogen); progesterone

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-36 BCRC; 60428 BCRJ; 0123 DSMZ; ACC-463 ECACC; 92120308

SARA蛋白抗體 SARA       SMCR7蛋白抗體 SMCR7

Ⅰ型補(bǔ)體受體重組兔單克隆抗體 CD35       AF680標(biāo)記的環(huán)氧合酶2/前列腺素內(nèi)過氧化物合成酶2抗體 Cyclooxygenase 2, Alexa Fluor 680 conjugated

吞噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)蛋白2抗體 ELMO2       維甲酸受體RAR α/RAR α抗體 RAR alpha

異染色質(zhì)蛋白1磷酸化抗體（果蠅） phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)       原癌基因WIP1抗體 PPM1D

G蛋白α抑制蛋白1抗體 GNAI2/G protein alpha inhibitor 1       G蛋白偶聯(lián)受體GPR157蛋白抗體 GPR157

減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體 MEI-1       金屬蛋白酶相關(guān)蛋白1抗體 OMA1

泛素蛋白連接酶重組兔單克隆抗體 Fbx32      肺癌和食道癌缺失基因1抗體 DLEC1

腦特異性跨膜蛋白抗體 NETO2       嘌呤嘧啶核酸內(nèi)切酶2抗體 APEX2（PROTEASE）定性檢測(cè)試劑盒       兔p53(p53)elisa檢測(cè)試劑盒

人二胺氧化酶(DAO)elisa分析檢測(cè)試劑盒       DAOELISAKit

純化線粒體總RNA萃取試劑盒       大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)elisa檢測(cè)試劑盒

NZCYM培養(yǎng)基NZCYM Broth 100g       通用型鈉離子（Na）濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒

小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa檢測(cè)試劑盒

植物賴（lysine）含量熒光定量檢測(cè)試劑盒       小鼠Smad7 elisa分析檢測(cè)試劑盒

JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)elisa檢測(cè)試劑盒       HISTONE H3蛋白共沉淀分析試劑盒

猴補(bǔ)體片斷3b(C3b)elisa分析檢測(cè)試劑盒       C3b ELISA kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。