細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產品名稱	K562/LUC (STR)人慢性髓系白血病細胞帶熒光素酶	英文名稱	K562/LUC
產品貨號	AXB9791	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	懸浮生長	細胞形態(tài)	母細胞樣
產品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	骨髓	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細胞別稱；K562-LUC-PURO；人慢性骨髓性白血病細胞系-熒光素酶標記；人慢性骨髓性白血病細胞系-LUC-PURO

種屬來源；人

組織來源；骨髓

生長特性；懸浮生長

細胞形態(tài)；母細胞樣

細胞代數(shù)；10代以內

背景介紹；Luciferase K-562細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時不需要添加維持?？捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。K-562細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。連續(xù)細胞株K-562是由Lozzio從一位臨終的53歲女性慢性骨髓性白血病患者的胸水中建立。K-562細胞被歸入高度未分化的粒性白細胞類，Erson等對其表面膜性質的研究表明，K-562細胞是一株人類紅白血病細胞。K-562細胞在自然殺傷分析中廣泛作為高敏感的體外受體，See Pross等將K-562細胞用于NK細胞的體外詳細檢測，包括NK細胞活性的數(shù)學量化。K-562母細胞是多能性造血惡性細胞，它能自發(fā)分化成可識別的紅血球祖細胞、粒性白細胞、單核細胞等。K-562細胞是EBNA陰性的。

生物等級；1

細胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

保藏機構；ATCC; CCL-243 BCRC; 60007 BCRJ; 0126 CCLV; CCLV-RIE 0439 DSMZ; ACC-10 ECACC; 89121407

培養(yǎng)基；RPMI-1640+10% FBS+PS+0.5ug/ml puro

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

人凋亡相關半胱氨酸肽酶4(Casp4)elisa分析檢測試劑盒       Casp4ELISAKit

細胞磷酸化酶活性染色試劑盒       人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)elisa檢測試劑盒

倉鼠丙二醛(MDA)elisa分析檢測試劑盒       MDA ELISA kit

MSL1蛋白抗體       MSL1

睪丸特異定蛋白質編碼Y1抗體  Anti-TSPY1       維甲酸相關孤兒受體α抗體  Anti-ROR1/ROR alpha

大鼠B細胞κ輕肽基因增強子核因子抑制因子α(NFKBIA)elisa檢測試劑盒       小鼠膜鐵轉運蛋白(FPN)elisa檢測試劑盒

外生性骨疣樣蛋白2抗體      EXTL2

神經營養(yǎng)因子-3前蛋白抗體  Anti-Neurotrophin 3/NT-3 proprotein       核基質結合區(qū)結合蛋白1抗體  Anti-SATB1EPS8L1蛋白抗體       EPS8L1

視神經細胞相關蛋白/早老素結合蛋白抗體       DOCK3

PE-Cy3標記的兔抗雞IgM       Rabbit Anti-Chicken IgM / PE-Cy3

人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa分析檢測試劑盒       humanβ2-MGELISAKit

豬白介素13(IL-13)elisa分析檢測試劑盒       IL-13ELISAKit

大鼠鈣調蛋白依賴性蛋白激酶激酶(CaMKK)elisa分析檢測試劑盒       CaMKK ELISA Kit

K562/LUC (STR)人慢性髓系白血病細胞帶熒光素酶豚鼠白介素2(IL-2)elisa分析檢測試劑盒       IL-2ELISAKit

甲基樣蛋白16抗體       METT10D

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。