商品屬性：

產品名稱	KASUMI-1人紅白血病細胞	英文名稱	KASUMI-1:KASUMI1
產品貨號	A01X806	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	懸浮生長	細胞形態(tài)	原粒細胞
產品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	外周血，急性原粒細胞白血病	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細胞別稱：KASUMI-1; Kasumi 1; KASUMI1; Kasumi1；人急性白血病細胞；人急性原粒細胞白血病細胞；人急性髓母白血病細胞

種屬來源：人

年齡性別：7歲，男

組織來源：外周血，急性原粒細胞白血病

生長特性：懸浮生長

細胞形態(tài)：原粒細胞

背景簡介：Kasumi-1細胞具有人急性白血病細胞的典型特征，是研究人急性白血病的**材料。Kasumi-1細胞是一個帶有8：21號染色體轉位的白血病細胞株，這個轉位使得AML1基因和ETO(或稱MTG8)基因串聯(lián)，使融合基因AML1-ETO(也稱作AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)的表達升高，因而細胞產生嵌合的AML1-ETO蛋白。這個蛋白下調CEBPA mRNA、蛋白和DNA的結合活性，而這種結合對粒性白細胞的分化是極端重要的。Kasumi-1細胞建立于一位急性白血病患者的外周血，Kasumi-1細胞髓過氧化物酶陽性，顯示其髓性成熟的形態(tài)。增生試驗顯示，培養(yǎng)的Kasumi-1細胞對IL-3、IL-6、G-CSF(粒細胞集落刺激因子)、GM-CS(粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子)有響應，但對IL-1和IL-5沒有響應。在體外液體培養(yǎng)中分別加入二甲亞砜、G-CSF、IL-5，也沒有觀察到粒性或嗜酸性細胞的成熟。Kasumi-1細胞培養(yǎng)過程中，加入佛波酯可以看到誘導出的巨噬細胞樣細胞。

生物等級：1

細胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達情況：

保藏機構：ATCC; CRL-2724 DSMZ; ACC-220

培養(yǎng)基：RPMI-1640+20% FBS+1%GlutaMAX-1谷氨酰胺+1%Sodium Pyruvate丙酮酸鈉+PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

倍增時間：~48-72 hours

STR鑒定位點Amelogenin：X，Y；D5S818: 9,11；D13S317: 11,13；D7S820: 8,11；D16S539: 9,12；vWA: 14；THO1: 6,9；Amelogenin: X；TPOX: 8,9；CSF1PO: 10,12

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。
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