細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟：

?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?：
?生物柜的使用?：確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外，防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?：提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境，保持恒定的溫度（通常為37℃）?。
?培養(yǎng)基和血清?：特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如糖、氨基酸和維生素，添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?：
?細(xì)胞接收與記錄?：記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息，包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?：定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為，確保細(xì)胞狀態(tài)健康，無污染?。
?細(xì)胞傳代?：當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代，注意消化時(shí)間和條件，避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?：
?細(xì)胞系鑒定?：通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征，防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?：定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存，確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。

本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

商品屬性：

產(chǎn)品貨號(hào)	A01X1077	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
產(chǎn)品分類	小鼠細(xì)胞系	產(chǎn)品種屬	小鼠
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	成纖維細(xì)胞
英文名稱	MC3T3-E1subclone 14:MC3T3E1subclone 14	組織來源	顱頂骨

商品介紹：

細(xì)胞別稱：MC3T3-E1subclone 14 ；小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14

種屬來源：小鼠

年齡性別：新生

組織來源：顱頂骨

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞

背景簡(jiǎn)介：MC3T3-E1subclone 14細(xì)胞株是從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。 從含抗壞血酸培養(yǎng)基：生長(zhǎng)的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。 MC3T3亞克隆4和MC3T3亞克隆14在抗壞血酸和3到4mM無機(jī)磷酸鹽中生長(zhǎng)表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。 它們10天后形成一個(gè)礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。MC3T3亞克隆24和MC3T3亞克隆30在抗壞血酸中生長(zhǎng)表現(xiàn)出很差的成骨細(xì)胞分化。 不形成ECM， 可以作為亞克隆4和14的陰性對(duì)照。 礦化的亞克隆選擇的表達(dá)作為成骨細(xì)胞標(biāo)記的mRNA，及唾液酸糖蛋白(BSP)，骨鈣素(OCN)，和甲狀旁腺/甲狀旁腺相關(guān)蛋白受體的mRNA。高或者低的分化潛能的亞克隆在培養(yǎng)中生產(chǎn)出相似數(shù)量的膠原質(zhì)，表達(dá)可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1，一種成骨細(xì)胞相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子。 植入缺陷小鼠以后，高分化性的亞克隆形成與骨類似的形成小骨的編織骨，低分化細(xì)胞只是產(chǎn)生纖維組織。 這些細(xì)胞系是研究體外成骨細(xì)胞分化的好模型，尤其是ECM信號(hào)。 它們和原代培養(yǎng)顱頂成骨細(xì)胞的行為類似。

生物等級(jí)：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無

基因表達(dá)情況：collagen

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-2594

培養(yǎng)基：90% DMEM+10% FBS+雙抗

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

?公司正在出售的產(chǎn)品：

BOLA2蛋白抗體       BOLA2

G蛋白結(jié)合蛋白3抗體  Anti-SPG3A/Atlastin       凋亡相關(guān)蛋白1抗體  Anti-RYBP/APAP1

長(zhǎng)波長(zhǎng)敏感的視蛋白抗體       Long wavelength-sensitive opsin

精子相關(guān)抗原11B抗體       SPAG11B

5-羥色胺受體5A抗體  Anti-5HT5A receptor/SR-5A       組蛋白賴氨酸去甲基化酶PHF8抗體  Anti-PHF8

G蛋白偶聯(lián)受體FM4/神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U受體2抗體  Anti-NMUR2/GPR-FM4       鋅指蛋白740抗體  Anti-ZNF740

睫狀神經(jīng)根卷曲螺旋蛋白抗體      CROCC

PEG3蛋白抗體  Anti-PEG3       轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2抗體（TGF-βRⅡ，TGFβRⅡ）  Anti-TGF beta R2/TGFBR2鋅指蛋白879抗體       ZNF879

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白158抗體       CCDC158

Cy3標(biāo)記羊IgM       Goat IgM / Cy3

大鼠抗血小板抗體(IgG)elisa分析檢測(cè)試劑盒       Rat platelet antibody IgG ELISA kit

小鼠RAR的相關(guān)孤獨(dú)受體C(RORC)elisa分析檢測(cè)試劑盒       RORCELISAkit

皮質(zhì)醇(Cortisol)elisa分析檢測(cè)試劑盒       Shark Cortisol ELISA Kit

MC3T3-E1subclone 14小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14人白介素35(IL-35)elisa分析檢測(cè)試劑盒       IL-35ELISAKit

PSP抗體       Persephin

培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。