細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	MEG-01人白血病細(xì)胞	英文名稱	Lu135：Lu-135
產(chǎn)品貨號	AXB7221	培養(yǎng)條件
生長特性	懸浮生長	細(xì)胞形態(tài)	母細(xì)胞樣；圓形
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	詳見說明
組織來源	成巨核細(xì)胞轉(zhuǎn)換期的骨髓細(xì)胞	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞介紹

MEG-01細(xì)胞株源自一位CML患者成巨核細(xì)胞轉(zhuǎn)換期的骨髓細(xì)胞。細(xì)胞質(zhì)因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa，高碘酸-Schiff(PAS)反應(yīng)，α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽性。髓過氧化物酶，α丁酸萘酯酶，氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和堿性磷酸酶陰性。用單克隆抗體BA-1(抗B細(xì)胞，粒性白細(xì)胞)，HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗單核細(xì)胞，血小板)染色成陽性。其他和骨髓類抗體成陰性。

細(xì)胞特性

1） 來源：人成巨核細(xì)胞轉(zhuǎn)換期的骨髓細(xì)胞

2） 形態(tài)：母細(xì)胞樣；圓形，懸浮生長

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

SFT2C       間隙連接蛋白29抗體

層粘連相關(guān)多肽蛋白1抗體       LAP1

細(xì)胞凋亡調(diào)控蛋白ZDHHC16抗體  Anti-ZDHHC16       囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SFT2C抗體

分選連接蛋白11抗體  Anti-SNX11       核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體  Anti-RelB

神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體  Anti-Septin 2/Sept2/NEDD5       MAWD結(jié)合蛋白抗體  Anti-PBLD

蜜蜂微孢子蟲蛋白抗體       Bee Microsporidia protein

NADH脫氫酶黃素蛋白1抗體  Anti-NDUFV1      Connexin-29

三磷酸腺苷門控陽離子通道蛋白抗體  Anti-P2RX4       ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子1抗體  Anti-Tap1/ABCB2鋅指蛋白749抗體       ZNF749

組織RSE激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）       人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)elisa生化檢測試劑盒

羊抗兔IgG H&L抗血清       Goat Anti-Rabbit IgG H&L whole serum

雞白介素6受體(IL-6R)elisa生化檢測試劑盒       IL-6R ELISA Kit

小鼠白介素11(IL-11)elisa生化檢測試劑盒       IL-11ELISAKIT

魚催乳素(PRL/LTH)elisa生化檢測試劑盒       PRL/LTH ELISA Kit

MEG-01人白血病細(xì)胞人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)elisa生化檢測試劑盒       HCV-IgMELISAKit

小鼠水通道蛋白3(AQP-3)elisa生化檢測試劑盒       大鼠激肽原(KNG)elisa檢測試劑盒

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。