細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	NCI-H226人肺鱗癌細胞	英文名稱	NCI-H226:NCIH226
產(chǎn)品貨號	A01X881	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%,
生長特性	貼壁細胞	細胞形態(tài)	上皮細胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	肺；源自轉(zhuǎn)移部位：胸腔積液	用途	僅供科研研究實驗

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認）

生長培養(yǎng)基:

RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2-3次/周

參考資料(來源文獻)

背景描述 NCI-H226 [H226]細胞是于1980年分離建立的。

年齡（性別） 男性

組織來源 肺；源自轉(zhuǎn)移部位：胸腔積液

細胞類型 腫瘤細胞

腫瘤類型 肺癌細胞

生物等級 BSL-1

倍增時間 ~60 hours

保藏機構 ATCC; CRL-5826

ZSCAN5/ZNF495       Dysfip1蛋白抗體

ATP合酶亞基O抗體       OSCP

絲氨酸/精氨酸相關核基質(zhì)蛋白2抗體  Anti-SRRM2       鋅指蛋白195抗體

DNA拓普西異構酶Ⅱ抗體  Anti-TOPO II/TOPO II Alpha       配對盒基因7抗體  Anti-PAX7

鋅轉(zhuǎn)運體8蛋白抗體  Anti-ZNT8       神經(jīng)肽W抗體  Anti-NPW/Neuropeptide W

CDK5和ABL1酶底物1抗體       CABLES1

肝磷酸酯酶1抗體  Anti-PRL1/PTP4A1      Dysferlin interacting protein 1

環(huán)指蛋白187抗體  Anti-RNF187       肌萎縮側(cè)索硬化癥相關蛋白4抗體  Anti-Senataxin/SETX人骨堿性磷酸酶(BALP)elisa生化檢測試劑盒       BALPELISAKit

軸突生長誘向因子4抗體  Anti-Netrin 4       鋅指蛋白923抗體  Anti-ZBTB40/ZNF923

大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)elisa生化檢測試劑盒       NAG ELISA Kit

體液基質(zhì)金屬（MMP-13）活性熒光定量檢測試劑盒       人白介素20(IL-20)elisa生化檢測試劑盒

大鼠補體片斷3(C3)elisa檢測試劑盒免費代測       小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)elisa檢測試劑盒

轉(zhuǎn)化生長因子β1結合蛋白1抗體       LTBP1

NCI-H226人肺鱗癌細胞有絲分裂蛋白BUB3重組兔單克隆抗體       Bub3

轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM2抗體  Anti-SIM2       核糖體蛋白S3抗體  Anti-RPS3

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。