商品屬性：

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

種屬來(lái)源；人

性別年齡；女性，18歲

組織來(lái)源；皮膚

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮樣

細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件；EMEM + 10% FBS，37 ℃, 5% CO2

凍存條件；90% FBS + 10% DMSO

傳代方法；1:3傳代, 2-3天傳1代

/酵母甲羥戊酸激酶（mevalonate kinase）活性比色法       小鼠維生素B12(VB12)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)elisa檢測(cè)試劑盒       飲料糖精（saccharin）含量比色法定量檢測(cè)試劑盒

小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)elisa分析檢測(cè)試劑盒       人波形蛋白（VIM）elisa檢測(cè)試劑盒

通用型DNA損傷彗星檢測(cè)試劑盒       磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 Phospho-CEBP beta (Thr235)

FAM194B蛋白抗體 FAM194B       鋅指蛋白90抗體 ZFP90

豚鼠25羥基維生素D3(25 HVD3)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠潛伏轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(LTBP1)elisa檢測(cè)試劑盒

硫酸乙酰肝素6腦苷脂轉(zhuǎn)硫酸酶1抗體 HS6ST1      EMSY蛋白抗體 EMSY

胸腺素β4抗體 Thymosin beta 4       促黃體誘導(dǎo)蛋白抗體 StAR絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白1抗體 MAP2K1IP1       PEST含核蛋白抗體 PCNP

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框48抗體       C19orf48

蛋氨酸氨肽酶2抗體 Methionine Aminopeptidase 2       絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶H2抗體 PSKH2

PE標(biāo)記小鼠F4/80單克隆抗體 mouse F4/80/PE       14-3-3 sigm重組兔單克隆抗體 14-3-3 sigma

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框2抗體 C1orf2       環(huán)指蛋白1抗體 RING1

基質(zhì)重塑相關(guān)蛋白7抗體 MXRA7       大鼠白介素2受體(IL-2R)elisa檢測(cè)試劑盒

RPMI-7951（人惡性黑色素瘤細(xì)胞）小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP3α)elisa檢測(cè)試劑盒       牛乳過(guò)氧化物酶(LPO)elisa分析檢測(cè)試劑盒

MCCC1蛋白抗體       MCCC1

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。