商品屬性：

產(chǎn)品名稱	RWPE-2 人前列腺正常細(xì)胞	英文名稱	RWPE-2 :RWPE2
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X938	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源	前列腺正常細(xì)胞	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱：RWPE-2；人前列腺正常細(xì)胞

種屬來(lái)源：人

年齡性別：男，54歲

組織來(lái)源：前列腺正常細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介：RWPE-2細(xì)胞是由Webber·M·M于1996年建株，該細(xì)胞來(lái)源于54歲白人男性。源于正常前列腺周邊組織的上皮細(xì)胞經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)染HPV-18后建系得到該細(xì)胞株。在三維基質(zhì)膠培養(yǎng)時(shí)，在雄作用下，RWPE-1細(xì)胞形成腺胞并向培養(yǎng)基：中分泌PSA（kallikrein 3, KLK3）。來(lái)源于RWPE-1的細(xì)胞再用Kirstin鼠類腫瘤病毒轉(zhuǎn)染Ki-ras基因，建立了能成瘤的RWPE-2細(xì)胞株和 RWPE2-W99細(xì)胞株。同時(shí)，用N-甲醇-N-硝基脲處理RWPE-1，建立了一系列模擬前列腺癌進(jìn)程中不同時(shí)期的成瘤細(xì)胞株， 分別是 WPE1-NA22, WPE1-NB14, WPE1-NB11 和 WPE1-NB26 細(xì)胞株。 據(jù)提供者報(bào)道，RWPE-1 細(xì)胞株經(jīng)過(guò)檢測(cè)，乙肝、丙肝、人缺陷病毒都呈陰性

生物等級(jí)：2

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無(wú)

基因表達(dá)情況：cytokeratin 18, cytokeratin 8

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-11610

培養(yǎng)基：K-SFM+0.05 mg/ml BPE +5 ng/ml EGF+ PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

ACTH ELISA kit       人二羥基賴正己氨酸(DHLNL)elisa分析檢測(cè)試劑盒

DHLNL檢測(cè)試劑盒       β-Actin 100ul

eosinophil-derivedneurotoxin)(RNASE2)檢測(cè)試劑盒       猴促腎上腺皮質(zhì)(ACTH)elisa分析檢測(cè)試劑盒

通用型精（arginine）含量化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒       INE1蛋白抗體

C1QTNF9       細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒

（SCHMORL）直接染色試劑盒       兔膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CHAT)elisa分析檢測(cè)試劑盒

INE1      補(bǔ)體C1qTNF9鏈多肽抗體

犬α1微球蛋白(α1-MG)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠12羥二十烷四烯酸(12-HETE)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)Proteasome 20S beta 6       細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)源蛋白122抗體

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框162抗體       C1orf162

小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)       蛋白酶體PSMβ6抗體

IFT122       肌營(yíng)養(yǎng)蛋白相關(guān)蛋白1抗體  Anti-Utrophin

血小板衍化生長(zhǎng)因子γ抗體  Anti-PAFAH1B3/PAFAHG       肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基5抗體  Anti-p16 ARC/ARPC5

分揀微管連接蛋白抗體  Anti-SNX25       辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的驢抗羊IgG H&L

RWPE-2 人前列腺正常細(xì)胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / HRP       FRG2B蛋白抗體

甲基樣蛋白15抗體       METTL15/METT5D1