
細胞系實驗步驟:
?一、細胞培養(yǎng)準備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細胞培養(yǎng)過程?:
?細胞接收與記錄?:記錄細胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細胞形態(tài)觀察?:定期檢查細胞的形態(tài)和行為,確保細胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細胞傳代?:當細胞密度超過80%時進行傳代,注意消化時間和條件,避免細胞損傷?。
三、?細胞系鑒定與維護?:
?細胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細胞的遺傳特征,防止細胞系被誤認或交叉污染?。
?細胞保存與管理?:定期進行細胞冷凍保存,確保細胞的長期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號 |
A01X957 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
產(chǎn)品分類 |
人細胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長特性 |
貼壁細胞 |
細胞形態(tài) |
多邊形 |
英文名稱 |
SK-MEL-28:SKMEL28 |
組織來源 |
皮膚 |
商品介紹:
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 多邊形
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認)
生長培養(yǎng)基:MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:8
推薦換液頻率 2-3天/次
參考資料(來源文獻)
年齡(性別) 男性;51歲
組織來源 皮膚
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 皮膚黑色素瘤
生物等級 BSL-1
倍增時間 27 hours (PubMed=7718330); 72
hours (PubMed=12479222); 26.9 hours (PubMed=20406486); 35.1 hours (NCI-DTP).
致瘤性 Yes; Yes, in nude mice; forms
malignant melanoma (large round cell type)
保藏機構(gòu) AddexBio; C0020001/66 ATCC; HTB-72 BCRJ; 0289 CLS; 300337 ICLC; HTL99010 NCI-DTP; SK-MEL-28 RCB; RCB1930 - Discontinued TKG; TKG 0333
?公司正在出售的產(chǎn)品:
25 HVD3 ELISA kit 人多巴胺D1受體(D1R)elisa分析檢測試劑盒
HumanD1R檢測試劑盒 魚白介素10(IL-10)elisa分析檢測試劑盒
BMP-6檢測試劑盒 猴25羥基維生素D3(25 HVD3)elisa分析檢測試劑盒
人中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)elisa檢測試劑盒 聚磷酸肌醇磷酸酶4B抗體
C4orf3 血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性熒光定量檢測試劑盒
大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)elisa檢測試劑盒 組織沉默調(diào)節(jié)蛋白1 (SIRT1)活性比色法定量檢測試劑盒
INPP4B 4號染色體開放閱讀框3抗體
人兒茶酚抑素elisa分析檢測試劑盒 大鼠干細胞因子受體(SCFR)elisa分析檢測試劑盒PRTG 線粒體內(nèi)膜蛋白酶樣IMP2抗體
4號染色體開放閱讀框17抗體 C4orf17
魚雌二醇(E2)elisa檢測試劑盒 PRTG蛋白抗體
IMMP2L 泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體 Anti-UBE2A/UBE2B/RAD6
神經(jīng)叢蛋白B2抗體 Anti-Plexin B2 植烷酰輔酶A羥化酶2相互作用蛋白抗體 Anti-PHYHIP
乳酸表面蛋白抗體 Anti-surface layer protein PE標記的驢抗人IgG H&L
SK-MEL-28人皮膚黑色素瘤細胞Donkey Anti-Human IgG H&L / PE FSTL3/FLRG蛋白抗體
氨基甲酸乙酰轉(zhuǎn)移酶抗體 NAGS
培養(yǎng)注意事項 :
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。