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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:人肝癌細(xì)胞;HEPARG

  • 產(chǎn)品型號(hào):AXB10631
  • 產(chǎn)品**:撫生
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簡(jiǎn)單介紹:
人肝癌細(xì)胞;HEPARG公司正在出售的產(chǎn)品:D407(視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞) 大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)elisa分析含量試劑盒 β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit 人核糖核酸酶,核糖核酸酶A家族,(肝臟,嗜酸性粒細(xì)胞源性神經(jīng))(RNASE2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
詳情介紹:


商品屬性:

產(chǎn)品名稱

人肝癌細(xì)胞;HEPARG

英文名稱

HEPARG

產(chǎn)品貨號(hào)

AXB10631

培養(yǎng)條件

氣相:95%空氣+5%二氧化碳;

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)

上皮細(xì)胞樣

產(chǎn)品種屬

凍存條件

無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

組織來(lái)源

肝臟

用途

僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情:

細(xì)胞別稱;HEPARG;人肝癌細(xì)胞

種屬來(lái)源;人

組織來(lái)源;肝臟

生長(zhǎng)特性;貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)

細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè);無(wú)

培養(yǎng)基;90%DMEM +10%FBS+PS

培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37

凍存條件;無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存


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細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí),進(jìn)行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。

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