商品屬性：

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品詳情：

細胞別稱；U2OS-LUC-PURO；人骨肉瘤細胞株-熒光素酶標記；人骨肉瘤細胞株-LUC-PURO

種屬來源；人

組織來源；骨

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；上皮細胞樣

背景簡介；Luciferase U-2 OS細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時不需要添加維持?？捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。U-2OS細胞(原名2T)是由Ponten·J和Saksela·E在1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。U-2 OS細胞與WI-38細胞共培養(yǎng)或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補體結合試驗(CF法)未檢測到病毒。U-2 OS細胞表達胰島素樣生長因子I、II(IGF-I、IGF-II)受體和骨肉瘤衍生生長因子(ODGF)。

生物等級；1

細胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

保藏機構；ATCC; HTB-96 DSMZ; ACC-785 ECACC; 92022711

培養(yǎng)基；McCoy's 5A＋10% FBS＋1% PS+1. 0ug/ml puro

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

MFRP       雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體

DPF2       小鼠Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PⅢNP)elisa檢測試劑盒

大鼠糜蛋白酶(Chymotrypsin)elisa檢測試劑盒       膜型卷曲相關蛋白MFRP抗體

中性木聚糖酶測定試劑盒       磷酸化異染色質蛋白1抗體（果蠅）

HSFY1       Toll樣受體6抗體  Anti-TLR6/CD286

氨基卞三磺酸（ANTS）熒光輔助糖蛋白電泳（FACE）       冰凍切片組織CDK6蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒

phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr24)      熱休克轉錄因子HSFY1抗體

G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y10抗體  Anti-P2Y10       含patatin樣磷脂酶6抗體  Anti-PNPLA6/NTERabbit Anti-Avidin / RBITC       磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1

人臂板蛋白3F(S3F)elisa生化檢測試劑盒       HumanS3FELISAKit

轉錄調(diào)控激活蛋白SNF5抗體  Anti-SNF5       羅丹明標記的兔抗親和素

phospho-GIT1 (Tyr545)       zeta相關蛋白70抗體  Anti-ZAP70

NUP54抗體  Anti-NUP54       軸突導向受體抗體  Anti-Robo

生長抑素抗體  Anti-Somatostatin       大鼠17羥孕酮(17-OHP)elisa分析檢測試劑盒

人骨肉瘤細胞+LUC;U20S-LUC-PURO17-OHP ELISA Kit       人輔酶Q10(CoQ10)elisa分析檢測試劑盒

魚17α,20β羥基孕酮(17α,20βOH-PROG)elisa生化檢測試劑盒       20βOH-PROG)ELISA kit

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。