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商品屬性:
產品貨號 |
AXB10080 |
凍存條件 |
無血清凍存液,液氮儲存 |
產品分類 |
人細胞系 |
產品種屬 |
人 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細胞形態(tài) |
上皮細胞樣 |
英文名稱 |
SW480/LUC |
組織來源 |
結腸 |
商品介紹:
細胞別稱;Sw480-LUC;人結腸癌細胞株-LUC;人結腸腺癌細胞-熒光素酶標記
種屬來源;人
組織來源;結腸
生長特性;貼壁生長
細胞形態(tài);上皮細胞樣
細胞代數(shù);p3-p8
特別注意;SW480-LUC細胞培養(yǎng)不能通入CO2,如果沒有條件準備空氣氣相100%的培養(yǎng)箱,可以采用不透氣密封蓋的T25培養(yǎng)瓶來培養(yǎng),培養(yǎng)過程中每天將細胞拿出培養(yǎng)箱換1-2次空氣
背景介紹;Luciferase SW480細胞穩(wěn)定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩(wěn)定,培養(yǎng)時不需要添加維持??捎米魑灮鹣x熒光素酶活性檢測中的陽性對照,也可用于活體動物成像實驗。SW480細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。SW480源自原位直腸腺癌,和SW620細胞源自同一病人一年后的結轉移。CSAp和直腸抗體3陰性角蛋白過氧化物酶染色陽性。p53基因第273位密碼子的G&rarrA突變引起Arg&rarrHis替代,309位密碼子的C&rarrT突變導致Pro&rarrSer替代。細胞p53蛋白表達水平,癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性,癌基因N-myc的表達未做檢測。SW480 [SW-480]細胞不表達細胞溶解酶,一種與腫瘤入侵相關的金屬蛋白酶。有報道稱,SW480 [SW-480]細胞表達GM-CSF。SW480 [SW-480]細胞ras原癌基因的12位密碼子有一個突變,可以用作PCR法檢測該突變的陽性對照。1978年11月,A·Leibovitz將其提交給ATCC時已傳代至第91代。
生物等級;1
細胞規(guī)格;1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
保藏機構;ATCC; CCL-228 DSMZ; ACC-313
ECACC; 87092801
培養(yǎng)基;90%L-15+10% FBS+PS+1.0ug/ml
puro
培養(yǎng)條件;氣相:100%空氣;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲存
培養(yǎng)注意事項 :
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題,責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
細胞系實驗步驟:
?一、細胞培養(yǎng)準備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質,如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細胞培養(yǎng)過程?:
?細胞接收與記錄?:記錄細胞系的相關信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細胞形態(tài)觀察?:定期檢查細胞的形態(tài)和行為,確保細胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細胞傳代?:當細胞密度超過80%時進行傳代,注意消化時間和條件,避免細胞損傷?。
三、?細胞系鑒定與維護?:
?細胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細胞的遺傳特征,防止細胞系被誤認或交叉污染?。
?細胞保存與管理?:定期進行細胞冷凍保存,確保細胞的長期存活和可用性?。
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