商品屬性：

產(chǎn)品名稱	人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞；HFLS-RA	英文名稱	HFLS-RA
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB10300	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來源	滑膜細(xì)胞	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱；HFLS-RA；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞

種屬來源；人

組織來源；滑膜細(xì)胞

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)；無

培養(yǎng)基；90%DMEM+10% FBS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

hnRNP H       銜接蛋白β抗體

AP2 beta       小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）elisa檢測(cè)試劑盒

8-OHdG檢測(cè)試劑盒       異質(zhì)核糖核蛋白H抗體

犬N端前腦鈉素(NT-proBNP)elisa檢測(cè)試劑盒       內(nèi)核膜蛋白MAN1抗體

Defensin alpha 5       SLFNL1抗體  Anti-SLFNL1

大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)elisa檢測(cè)試劑盒       ?細(xì)胞IP3R受體蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒

MAN1     

環(huán)指蛋白23抗體  Anti-RNF23       核酪蛋白激酶和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶底物1抗體  Anti-NUCKS1Tenascin R       髓細(xì)胞/細(xì)胞或混合譜系白血病蛋白6抗體

人層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)elisa生化檢測(cè)試劑盒       HumanLAMC2ELISAKit

WEE1蛋白抗體  Anti-WEE1 protein       腱糖蛋白R抗體

MLLT6       低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白9抗體  Anti-SorLA/LRP9

磷脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗體  Anti-PIK3 gamma       6磷酸果糖激酶2抗體  Anti-PFK2/PFKFB3

白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體  Anti-TIRAP       PE標(biāo)記小鼠IgG1（型對(duì)照）

人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞；HFLS-RAMouse IgG1 / PE Isotype Control       G蛋白偶聯(lián)受體激酶7抗體

魚去甲腎上腺素(NE)elisa生化檢測(cè)試劑盒       NE ELISA kit