商品屬性：

產(chǎn)品名稱	人皮膚成纖維細(xì)胞（國內(nèi)建系永生化處理）；HDF-SV40T	英文名稱	HDF-SV40T
產(chǎn)品貨號	AXB10295	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	成纖維樣細(xì)胞
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	皮膚	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

種屬來源；人

組織來源；皮膚

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；成纖維樣細(xì)胞

背景簡介；皮膚指身體表面包在肌肉外面的組織，是人體大的器官，主要承擔(dān)著保**體、排汗、感覺冷熱和壓力等功能。皮膚由表皮、真皮和皮下組織構(gòu)成。成纖維細(xì)胞屬于由中胚層分化而來的間質(zhì)細(xì)胞。由于這些細(xì)胞非常容易培養(yǎng)，它們已經(jīng)被廣泛用于細(xì)胞和分子生物學(xué)研究中。一般而言，成纖維細(xì)胞能夠分泌 I 型和 III 型膠原等細(xì)胞外基質(zhì)，并且研究表明不同器官中的成纖維細(xì)胞有顯著的不同。傷口修復(fù)時，真皮成纖維細(xì)胞由可增殖，可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的，可重塑基質(zhì)的表型，同時，它們會分泌大量的透明質(zhì)酸來應(yīng)對修復(fù)時的炎癥反應(yīng)。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶 SV40 基因。

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；HDF-SV40T細(xì)胞完全培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Islet 2       DNA修復(fù)酶相互作用蛋白抗體

APLF       小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b（TRACP 5b）elisa檢測試劑盒

人水通道蛋白-2（AQP2）elisa檢測試劑盒       胰島素基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白2抗體

牛胰島素(Insulin)elisa分析檢測試劑盒       CTR1抗體

C21orf87       腫瘤壞死因子受體相互作用蛋白抗體  Anti-TRIP

超敏C反應(yīng)蛋白Hs-CRP試劑盒 R1：40ml×1 R2：10ml×1 膠乳增強(qiáng)       冰凍切片組織線粒體復(fù)合物I蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒

MT      21號染色體開放閱讀框87抗體

Rho GTP酶激活蛋白29抗體  Anti-Rho GTPase activating protein 29       核因子κB抑制蛋白β抗體  Anti-IKB betaVWCE       DENND1C蛋白抗體

人單純皰疹病毒Ⅰ+Ⅱ型(HSVⅠ+Ⅱ)抗體(IgG)elisa生化檢測試劑盒       HumanherpessimplexvirusⅠ+Ⅱ(HSVⅠ+Ⅱ)antibody(IgG)ELISAkit

原基因18家族STMN3蛋白抗體  Anti-STMN3       乙型肝炎病毒X蛋白上調(diào)基因11抗體

DENND1C       蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體  Anti-SHP-2/PTPN11

核抑制蛋白磷酸酶1抗體  Anti-NIPP1/ARD1       視黃醛脫氫酶2型抗體  Anti-RALDH2

TBR1蛋白抗體  Anti-TBR1       大鼠封閉蛋白4(CLDN4)elisa分析檢測試劑盒

人皮膚成纖維細(xì)胞（國內(nèi)建系永生化處理）；HDF-SV40TCLDN4 ELISA Kit       豚鼠白介素13(IL-13)elisa分析檢測試劑盒

鵝鈣結(jié)合蛋白(CR)elisa生化檢測試劑盒       CR ELISA Kit