產(chǎn)品名稱
人冠狀動脈平滑肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
冠狀動脈
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
人原代細胞
貨號
A01X1272
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
人冠狀動脈平滑肌細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支。左冠狀動脈為一短干，發(fā)自左主動脈竇，經(jīng)肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構(gòu)成冠狀動脈壁的主要細胞成分，細胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道；它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復(fù)極化、超極化，調(diào)節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此，原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞，對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
方法簡介：
公司實驗室分離的人冠狀動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人冠狀動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
組織低密度脂蛋白（LDL-Cholesterol）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
動物細胞染色體分離試劑盒
大鼠胰島素(INS)elisa檢測試劑盒
組織維生素A含量比色法定量檢測試劑盒
小鼠S100蛋白(S-100)elisa檢測試劑盒
大鼠骨成型蛋白2(BMP2)elisa檢測試劑盒
α-亞麻酸含量試劑盒（HPLC）
人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)elisa檢測試劑盒
乳酸鏈球菌（Streptococcus）噬菌體特異性PCR
FITC標記小鼠CD206單克隆抗體 mouse CD206/FITC
G21蛋白質(zhì)抗體 G21 protein/NPR2L
麻瘋病和帕金森氏病共調(diào)節(jié)蛋白抗體 PACRG
膜粘連蛋白 A4重組鼠單克隆抗體 Annexin IV
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體 APLP1
多能發(fā)育相關(guān)基因5抗體 DPPA5
嗅覺受體5M11抗體 OR5M11
血小板膜糖蛋白Ⅱb（CD41）重組兔單抗 CD41/ITGA2B
Rho GTP酶激活蛋白32抗體 ARHGAP32
SALFf蛋白抗體 SALF
髓鞘少樹突膠質(zhì)細胞糖蛋白抗體 MOG
特異性鉀離子通道蛋白抗體 ERG/KCNH2
甲基化樣蛋白7A抗體 METTL7A
間隙連接蛋白31抗體 GJB3
20號染色體開放閱讀框74抗體 C20orf74
9號染色體開放閱讀框117抗體 C9orf117
人熱休克蛋白60（HSP60）elisa檢測試劑盒
人冠狀動脈平滑肌細胞動物細胞醛酮還原酶1E（aldo-keto reductase 1E）活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠脂解激活脂蛋白受體(LSR)elisa檢測試劑盒
Equilibrative NBMPR-sensitive nucleoside transporter; equilibrative nitrobenzylmercaptopurine riboside (NBMPR)-sensitive nucleoside transporter; Equilibrative nitrobenzylmercaptopurine riboside-sensitive nucleoside transporter; Equilibrative nucleoside transporter 1; es-type; MGC1465; MGC3778; Nucleoside transporter; Nucleoside transporter, es-type; OTTHUMP00000016506; OTTHUMP00000016507; OTTHUMP00000016508; OTTHUMP00000016509; OTTHUMP00000016510; OTTHUMP00000016511; OTTHUMP00000016512; S29A1_HUMAN; SLC29A1; solute carrier family 29 (nucleoside transporters), member 1; Solute carrier family 29 member 1.
人角膜內(nèi)皮細胞
小鼠腎動脈內(nèi)皮細胞
KU812人外周血嗜堿性白血病細胞
CCD-13Lu人肺成纖維細胞