培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人破骨細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
骨髓
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
多核巨細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1420
用途
僅供科研實(shí)驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 多核巨細(xì)胞
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
人破骨細(xì)胞分離自骨組織和骨髓；破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng)，其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡，若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機(jī)制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞，屬于不增殖細(xì)胞群，不能增殖和傳代，只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時間較短。
方法簡介：
公司實(shí)驗室分離的人破骨細(xì)胞采用機(jī)械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗室分離的人破骨細(xì)胞經(jīng)TRAP染色檢測，純度可達(dá)30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠胱天蛋白酶10(CASP-10)elisa分析檢測試劑盒
豚鼠球蛋白A(IgA)elisa分析檢測試劑盒
通用型宋內(nèi)志賀菌Shigella sonnei 基因檢測試劑盒
活體組織線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒
大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)elisa檢測試劑盒
人變腎上腺素(MN)elisa分析檢測試劑盒
白三烯C4（LTC4）高效液相色譜法定量檢測試劑盒
小鼠胰脂肪酶(PL)elisa檢測試劑盒
大鼠流行性出血熱IgG抗體elisa檢測試劑盒
FAM73A蛋白抗體 FAM73A
FITC標(biāo)記人CD13單克隆抗體 human CD13/FITC
磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 phospho-CDK5 (Tyr15)
流感病毒H3N7血凝素抗體 H3N7 hemagglutinin
蛋白激酶C抗體 PKA C alpha + beta
登革熱病毒2糖蛋白NS1抗體 DENV-2 NS1
鋅指蛋白84抗體 ZNF84
性結(jié)合球蛋白抗體 SHBG
PRKR相互作用蛋白1抗體 PRKRIP1
ras癌基因家族Rab3b單克隆抗體 RAB3B
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶2抗體 NRK2/NEK4
絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶3抗體 MAPKAP3
肌球蛋白9B抗體 MYO9B
激活素受體2B抗體 Activin Receptor Type IIB
12號染色體開放閱讀框52抗體 RITA
20號染色體開放閱讀框134抗體 C20orf134
大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶1(ECE1)elisa檢測試劑盒
人破骨細(xì)胞鴨球蛋白E(IgE)elisa分析檢測試劑盒
人蛋白C(PC)elisa分析檢測試劑盒
ACOX 2; Acyl Coenzyme A oxidase 2; Acyl Coenzyme A oxidase 2 branched chain; Acyl coenzyme A oxidase 2 peroxisomal; BCOX; BRCACOX; BRCOX; Peroxisomal branched chain acyl CoA oxidase; THCA CoA oxidase; THCCox; Trihydroxycoprostanoyl CoA oxidase; 3 alpha 7 alpha 12 alpha trihydroxy 5 beta cholestanoyl CoA oxidase; 3 alpha 7 alpha12 alpha trihydroxy 5 beta cholestanoyl CoA 24 hydroxylase; ACOX2_HUMAN.
人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞
小鼠前列腺基底細(xì)胞
MCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞
CHO倉鼠卵巢細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。