培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
人胎盤間充質干細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
胎盤組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
人原代細胞
貨號
A01X1492
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
人胎盤間充質干細胞細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的，是一個重要的器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。胎盤間充質干細胞（mesenchymal stem cell，MSC）是一種多能干細胞，是具有自我復制能力的多潛能細胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細胞像APSC多能細胞。在胚胎發(fā)育中來源于中胚層。在機體正常的組織損傷修復過程中，MSC是一種重要的參與組織再生的細胞庫。在組織損傷引起的特殊信號作用下，MSC遷移到受損部位，在局部聚集增殖，依據不同的損傷信號沿著不同途徑分化。MSC易于分離擴增，體外倍增能力旺盛，能保持其多向分化能力。因此，MSC是一種實用的組織修復種子細胞。相較于其他干細胞，胎盤間充質干細胞具有來源方便，細胞數量充足，易于分離、培養(yǎng)、擴增和純化，傳代擴增多代后仍具有干細胞特性。胎盤是干細胞的佳來源。
方法簡介：
公司實驗室分離的人胎盤間充質干細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人胎盤間充質干細胞經CD90熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品：
MouseopiorphinELISAkit
小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)elisa分析檢測試劑盒
POMC ELISA kit
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)elisa分析檢測試劑盒
HumanIL-2sRβELISAKit
大鼠細胞間粘附分子1(ICAM1)elisa檢測試劑盒
冰凍切片組織CDK3蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
小鼠25羥基維生素D3(25 HVD3)elisa檢測試劑盒
組化超敏型HRP－TMB底物顯色試劑盒
蛛受體3抗體
LPHN3
細胞質FMR1相關蛋白抗體
CYFIP1
絲氨酸消旋酶 Anti-Serine racemase
RH血型C糖蛋白抗體 Anti-RHCG
神經細胞粘附蛋白NGN抗體 Anti-NGN/Neogenin
鋅指蛋白342抗體 Anti-ZNF342/ZNF296
精子發(fā)生相關蛋白24抗體
SPATA24
溶血磷脂酰?；D移酶2抗體
MBOAT2
細胞分化蛋白SEP1抗體 Anti-SEPT1
蛋白酶體PSMβ7抗體 Anti-Proteasome 20S beta 7
P73腫瘤抑制基因抗體 Anti-P73 protein
細胞粘合素(固生蛋白)抗體 Anti-Tenascin C/Tn-C
Alexa Fluor 680標記羊IgG
人胎盤間充質干細胞Goat IgG / AF680
G蛋白偶聯受體LGR7蛋白抗體
Arylsulfatase B; ArylsulfataseB; ASB; G4S; MPS6; N acetylgalactosamine 4 sulfatase.
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞
小鼠毛囊角質細胞
MV3人黑色素瘤細胞
COS-7非洲綠猴腎細胞 SV40轉化
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。