培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人胃黏膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
胃組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1286
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
人胃黏膜上皮細(xì)胞分離自胃黏膜組織；胃黏膜柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞，充盈時(shí)變平坦。幽門(mén)處的黏膜形成環(huán)形皺襞，突向腔內(nèi)稱幽門(mén)瓣。胃黏膜可分為三層，即上皮層（單層柱狀上皮）、固有層（由結(jié)締組織構(gòu)成、含有大量的胃腺）和黏膜肌層（為薄層平滑肌、排列成內(nèi)環(huán)外縱）。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層，細(xì)胞為單層柱狀上皮，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋白酶對(duì)胃黏膜的損害。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子、、對(duì)細(xì)胞的損傷、保護(hù)和功能調(diào)控提供了簡(jiǎn)單而的模型。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胃黏膜上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人胃黏膜上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)elisa檢測(cè)試劑盒
層粘連相關(guān)多肽蛋白1抗體
LAP1
蜜蜂微孢子蟲(chóng)蛋白抗體
Bee Microsporidia protein
大鼠腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)elisa檢測(cè)試劑盒
冰凍切片組織PAR-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
小鼠CD34分子(CD34)elisa檢測(cè)試劑盒
一步法平端PCR反應(yīng)液
非霍奇金瘤重復(fù)蛋白3抗體
NHLRC3
7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框63抗體
C7orf63
硫氧還蛋白抗體 Anti-Thioredoxin
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗體 Anti-phospho-p38 MAPK/MAPK14(Thr180/Tyr182)
少突細(xì)胞髓磷脂糖蛋白抗體 Anti-Omgp
精胺合成酶抗體 Anti-SPSY/Spermine synthase
G蛋白偶聯(lián)受體71抗體
GPR71
胞漿接頭蛋白Dok6抗體
DOK6
轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體 Anti-WSTF
神經(jīng)外營(yíng)養(yǎng)蛋白2抗體 Anti-NXPH2
Ras蛋白特異鳥(niǎo)嘌呤核苷酸釋放因子1抗體 Anti-Rasgrp1
13號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體 Anti-SLAIN1/C13orf32
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人胃黏膜上皮細(xì)胞IL-1ra ELISA kit
人肌酐(Cr)elisa分析檢測(cè)試劑盒
E2(17)KB1; SFT; Stimulator of Fe transport; UB2D1_HUMAN; UBC 4/5; UBC4/5; UBC4/5 homolog; UBCH 5; UBCH 5A; UBCH5; UBCH5A; Ube2d1; Ubiquitin carrier protein; Ubiquitin carrier protein D1; Ubiquitin conjugating enzyme E2 17 kDa 1; Ubiquitin conjugating enzyme E2 D1; Ubiquitin conjugating enzyme E2D 1 (UBC4/5 homolog yeast); Ubiquitin conjugating enzyme E2D 1; Ubiquitin protein ligase D1; Ubiquitin-conjugating enzyme E2 D1; Ubiquitin-conjugating enzyme E2(17)KB 1; Ubiquitin-conjugating enzyme E2-17 kDa 1; Ubiquitin-protein ligase D1.
人小腸平滑肌細(xì)胞
小鼠卵泡膜細(xì)胞
NCI-H1299人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
CT26.WT/LUC 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。