產(chǎn)品名稱
人羊膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
胎盤
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1490
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人羊膜上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
人羊膜上皮細(xì)胞分離自胎盤組織；胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的，是一個(gè)重要的器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的人羊膜上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的人羊膜上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
石蠟切片銅熒光（CSI）染色試劑盒
電壓門控鉀通道亞基Kv7.5抗體
KCNQ5
尾側(cè)型源轉(zhuǎn)錄因子1抗體
CDX1
人促胃液素受體(GsaR)elisa檢測試劑盒
腸C（Staphylococcus aureus : enterotoxin C）鑒定16S rDNA PCR擴(kuò)增檢測試劑盒
小鼠組氨酸豐富糖蛋白(HRG)elisa檢測試劑盒
大鼠凝血因子XIV(FXIV/protein C)elisa檢測試劑盒
E3泛素連接酶NEDD4結(jié)合蛋白1抗體
N4BP1
纖連蛋白2抗體
Fibulin 2
味覺受體蛋白家族2亞基60抗體 Anti-T2R60
磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 Anti-phospho-PRKD1(Tyr463)
磷酸化一氧化氮合成酶3（內(nèi)皮型）抗體 Anti-Phospho-eNOS (Thr495)
絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Anti-SEK1/MKK4/MAP2K4
萊克多巴胺單克隆抗體
Ractopamine
腎病樣蛋白3抗體
NLG1
滑膜肉瘤X斷點(diǎn)蛋白5抗體 Anti-SSX5
核孔蛋白50抗體 Anti-NUP50
結(jié)合蛋白4抗體 Anti-RBP4
轉(zhuǎn)導(dǎo)素β1X連鎖蛋白抗體 Anti-TBL1X
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa分析檢測試劑盒
人羊膜上皮細(xì)胞MCP-3 ELISA kit
人結(jié)核菌素(Tuberculin)elisa分析檢測試劑盒
Acat2; acetoacetyl CoA thiolase; acetoacetyl Coenzyme A thiolase; Acetyl CoA acetyltransferase; Acetyl CoA transferase like protein; acetyl Coenzyme A acetyltransferase 2; Acetyl-CoA acetyltransferase; Acetyl-CoA transferase-like protein; Acyl Coenzyme A cholesterol acyltransferase 2; Cytosolic acetoacetyl-CoA thiolase; cytosolic; SOAT2; SOAT2_HUMAN.
人胰腺星狀細(xì)胞
小鼠結(jié)膜上皮細(xì)胞
NCI-H226人肺鱗癌細(xì)胞
D407(視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞)