培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人主動脈平滑肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
主動脈組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
人原代細胞
貨號
A01X1275
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
人主動脈平滑肌細胞分離自主動脈組織；主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為：升主動脈起于左心室，至右側第2胸肋關節(jié)高度移行為主動脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈；在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈，以上為胸主動脈，至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈；髂總動脈在骶髂關節(jié)高度分為髂內、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象，探討心血管相關發(fā)病機制是目前研究的熱點；體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的人主動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人主動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠肌微管素相關蛋白9(MTMR9)elisa檢測試劑盒
肝脂酶（HL）測試盒
通用型十字花科蔬菜黑腐病菌（Xanthomonas campestris pv.armoraciae； Xcarm）基因檢測試劑盒
動物細胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量檢測試劑盒
大鼠組胺(HIS)elisa檢測試劑盒
小鼠白介素25(IL25/C19orf10)elisa檢測試劑盒
大鼠 Klotho elisa分析檢測試劑盒
細胞鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
犬C反應蛋白(CRP)elisa分析檢測試劑盒
FGD4蛋白抗體 FGD4
FITC標記小鼠CD90單克隆抗體 mouse CD90/FITC
磷脂酰肌醇激酶調節(jié)亞單位gamma重組兔單克隆抗體 PIK3R3
錨蛋白重復及SAM結構域蛋白6抗體 ANKS6
蛋白偶聯(lián)受體56抗體 GPR56
凋亡抑制因子1抗體 cIAP1
信號轉導蛋白亞基6抗體 COPS6
選擇性剪接因子1抗體 SRSF1/SF2
RAN結合蛋白7抗體 RanBP7
RNA結合蛋白10抗體 RBM10
絲聚蛋白/中間絲相關蛋白抗體 Filaggrin
胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體 BPTF
基質金屬蛋白酶3抗體 MMP3
甲胎蛋白AFP抗體 AFP
1號染色體開放閱讀框144抗體 C1orf144
3-氨基-2-惡唑烷酮單克隆抗體 3-AMINO-2-OXAZOLIDINONE
大鼠(NA)elisa檢測試劑盒
人主動脈平滑肌細胞魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)elisa分析檢測試劑盒
人肥大細胞類胰蛋白酶(MCT)elisa檢測試劑盒
UHRF1_HUMAN; E3 ubiquitin-protein ligase UHRF1; ICBP90; NP95; RNF106; TDRD22; hUHRF1; huNp95; EC:2.3.2.27; Inverted CCAAT box-binding protein of 90 kDa; Nuclear protein 95; Nuclear zinc finger protein Np95 (HuNp95; hNp95); RING finger protein 106; RING-type E3 ubiquitin transferase UHRF1; ubiquitin like with PHD and ring finger domains 1;
人主動脈外膜成纖維細胞
小鼠角膜基質細胞
NCI-H522 人非小細胞肺癌腺癌細胞
DoTc2-4510人宮頸癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。