培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
睪丸
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2127
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞分離自睪丸組織；睪丸間質(zhì)細(xì)胞成群分布在曲精小管之間，胞體呈圓形，橢圓形或不規(guī)則形，胞體較大，直徑約20μm，胞質(zhì)呈嗜酸性，細(xì)胞核呈圓形或卵圓形，常位于中央，染色較淡，有1-2個(gè)核仁線粒體多，呈管嵴狀，無(wú)分泌顆粒。從青春期開(kāi)始，睪丸間質(zhì)細(xì)胞受垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的間質(zhì)細(xì)胞刺（黃體生成素）的作用，能合成分泌雄性，可促進(jìn)精子的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育，以及維持性征和性功能。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞經(jīng)3β-HSD熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
FAM172AELISAkit
核黃素轉(zhuǎn)運(yùn)因子1(RFT1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
RFT1 ELISA Kit
人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)elisa分析檢測(cè)試劑盒
ICEELISAKit
小鼠丙二醛(MDA)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
組織β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
人8-羥基鳥(niǎo)嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
LUC7L2蛋白抗體
LUC7L2
細(xì)胞色素P450 IVF8抗體
CYPIVF8
神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK3抗體 Anti-SLITRK3
環(huán)指蛋白122抗體 Anti-RNF122
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸酶1抗體 Anti-Nmnat1
Z DNA結(jié)合蛋白抗體 Anti-Z DNA binding protein
SPOP蛋白抗體
SPOP
MEMO1蛋白抗體
MEMO1
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接蛋白1抗體 Anti-STAM
外周苯二氮受體抗體 Anti-PBR/DBI/TSPO
顆粒蛋白前體抗體 Anti-PGRN/Granulin
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體 Anti-TNFAIP1
FITC標(biāo)記大鼠IgG（型對(duì)照)
兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞Rat IgG / FITC
G蛋白偶聯(lián)受體112抗體
EndoG; Endonuclease G; Endonuclease G mitochondrial; EndonucleaseG; FLJ27463; ENDOG; NUCG_HUMAN; Endo G.
兔睪丸支持細(xì)胞
小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
Panc 05.04人胰腺癌上皮細(xì)胞
F56人腺癌細(xì)胞系
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。