
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠嗅鞘細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
嗅球組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
神經(jīng)元細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1966
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
小鼠嗅鞘細胞分離自嗅球組織;嗅鞘細胞(OECs)是在功能上介于施旺細胞和少突膠質(zhì)細胞之間的一種特殊的膠質(zhì)細胞,具有神經(jīng)營養(yǎng)、抑制膠質(zhì)增生、瘢痕形成、成鞘作用等;為軸突生長提供了適宜的微環(huán)境及較強的遷移的特性,使其成為促進神經(jīng)再生的理想候選細胞之一。嗅鞘細胞是目前所發(fā)現(xiàn)的極少數(shù)的神經(jīng)系統(tǒng)可以再生細胞之一,其特點為終身具有神經(jīng)再生功能,還能夠釋放多種神經(jīng)營養(yǎng)因子、神經(jīng)粘附分子。被認為是髓鞘化能力強的膠質(zhì)細胞,逐漸用于脊髓損傷。嗅鞘細胞與膠質(zhì)細胞、雪旺細胞在表現(xiàn)型上有共同點,它們都能促進軸突的再生,主要區(qū)別在于嗅鞘細胞不但存在于神經(jīng)系統(tǒng),也存在于外周神經(jīng)中。嗅鞘細胞被認為是一種可塑性很高的細胞,它可表現(xiàn)出多種細胞形態(tài)和細胞表面標志,在嗅系統(tǒng)發(fā)育過程中,嗅鞘細胞根據(jù)其在組織定位的不同而有不同的抗原表型,其中P75NTR、GFAP、和O4可標記大部分在體嗅鞘細胞,然而在嗅球外神經(jīng)層O4陽性嗅鞘細胞仍然可以在P75NTR陽性細胞層內(nèi)分化成E-NCAM陽性的細胞層,還有一定比率的嗅鞘細胞P75NTR陰性而NY和S100表型為陽性。嗅黏膜中的神經(jīng)元是生后才生長并在成年時繼續(xù)分化的神經(jīng)元,壽命為4-12周,隨著新細胞的生長,又建立了新的神經(jīng)支配關(guān)系。嗅鞘細胞存在于嗅神經(jīng)及嗅球的神經(jīng)層上,沿嗅神經(jīng)的全長,從周圍神經(jīng)系統(tǒng)到神經(jīng)分布。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠嗅鞘細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠嗅鞘細胞經(jīng)GFAP熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
葡萄糖含量測試盒
小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)elisa檢測試劑盒
大鼠KiSS-1受體(KISS1R)elisa檢測試劑盒
全組織熒光顯微鏡間接檢測試劑盒(含熒光二抗)
人Corin elisa分析檢測試劑盒
活體細胞線粒體跟蹤試劑盒
大鼠鐵調(diào)素(Hepc)elisa檢測試劑盒
植物磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)活性
線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測試盒
原鈣粘蛋白γA5抗體 PCDHGA5
粘蛋白-5B抗體 MUC5B
分泌載體膜蛋白1抗體 SCAMP1
富含脯氨酸蛋白24抗體 PRR24
G蛋白偶聯(lián)受體激酶6抗體 GRK6
HS3ST3B1蛋白抗體 HS3ST3B1
凝血因子11輕鏈抗體 Factor XI light chain
前列環(huán)素合成酶抗體 CYP8A1
AF750標記的神經(jīng)元核抗原抗體 NeuN, Alexa Flour 750 conjugated
APC標記人CD33單克隆抗體 human CD33-APC
聚合酶延伸因子抗體 ELL
可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白22A17抗體 SLC22A17
TPRX1蛋白抗體 TPRX1
WD重復(fù)蛋白16抗體 WDR16
微管關(guān)聯(lián)蛋白RP/EB家族成員1抗體 MAPRE1
細胞分裂周期蛋白25C抗體 Cdc25C
單克隆抗體小鼠來源 50ul、100ul
小鼠嗅鞘細胞石蠟切片組織AKT蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
小鼠c-fos elisa檢測試劑盒免費代測
Lanoxin
產(chǎn)品類型小分子抗體
小鼠牙髓干細胞
兔卵巢表面上皮細胞
RLE-6TN大鼠肺泡II型細胞
KP4-3人胰腺導(dǎo)管腺癌
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。