
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠腸粘膜上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腸道組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
不規(guī)則細胞
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1585
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)來源:腸道組織
2)含量:>5x105 個/mL
3)鑒定:角蛋白(PCK)熒光染色法
4)純度:>85%
5)污染:支原體、、酵母和檢測為陰性
6)規(guī)格:1mL凍存管包裝
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代上皮細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)試劑。
細胞簡介:
腸指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長的一段,也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。
腸壁結(jié)構(gòu)一般分4層,由外向內(nèi)依次為:漿膜層,平滑肌層,粘膜下層和粘膜層。粘膜層又分為3層:靠近粘膜下層的是一層平滑肌,稱為粘膜肌層。其次為結(jié)締組織,又稱為固有層。后面向腸腔的是一層柱狀上皮細胞構(gòu)成的粘膜。小腸粘膜有縱行和橫行皺襞,并有無數(shù)細小的指狀突起,稱為絨毛。絨毛的基底處粘膜內(nèi)陷成管狀,稱為利貝屈恩氏隱窩。
隱窩基底部的上皮細胞不斷地進行有絲分裂,產(chǎn)生新細胞。隱窩上皮中還有許多杯狀細胞,它分
公司正在出售的產(chǎn)品:
魚細胞色素C氧化酶(COX)elisa檢測試劑盒
小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa檢測試劑盒
大鼠γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)elisa分析檢測試劑盒
細胞糖原化學水解比色法定量檢測試劑盒
人s可溶性CD105 sCD105elisa檢測試劑盒
血液組織纖維型蛋白溶酶原激活劑(tPA)活性比色法定量檢測試劑盒
大鼠胰島素(INS)elisa檢測試劑盒
血液維生素A含量熒光定量檢測試劑盒
小鼠Sestrin小鼠1蛋白(SESN1)elisa檢測試劑盒
長鏈脂肪酸輔酶A連接酶抗體 SLC27A2
脂肪瘤高遷移率融合蛋白樣蛋白5抗體 LHFPL5
鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體 CaMK2 alpha
甘油激酶5抗體 GK5
IL-1相關(guān)Ig受體抗體 SIGIRR
KIAA0195蛋白抗體 KIAA0195
前列腺腫瘤高表達蛋白1抗體 PTOV1
去泛素酶10抗體 USP10
APC標記人TCR α/β單克隆抗體 human TCR α/β/APC
B4GALT6抗體 B4GALT6
跨膜蛋白111抗體 TMEM111
蛋白激酶BTK抗體 ATK/BTK
X染色體開放閱讀框21抗體 CXorf21
β淀粉樣蛋白結(jié)合蛋白抗體 TM2D1
細胞凋亡誘導蛋白NALP3抗體 NALP3/CIAS1
細胞色素C氧化酶蛋白6A1抗體 COX6A1
雞elisa分析檢測試劑盒
大鼠腸粘膜上皮細胞Donkey Anti-Guinea Pig IgG H&L / Gold
鋅指蛋白ZNF377抗體
Osmosis responsive factor; OSRF; Tetratricopeptide repeat domain 33; TPR repeat protein 33; Tetratricopeptide repeat protein 33; TTC33_HUMAN.
大鼠腸粘膜上皮細胞
兔海綿體平滑肌細胞
MDBK牛腎細胞
LLC小鼠肺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。