培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠肝外膽管上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
膽管組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
鋪路石狀細胞
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1568
用途
僅供科研實驗
細胞特性：
1）組織來源于實驗動物的正常膽管組織。
2)細胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：鋪路石狀細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 原代上皮 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介：
肝外膽管由左右肝管、肝總管、膽總管組成。肝內(nèi)膽管經(jīng)多級匯合形成左、右肝管，左、右肝管出肝后，在肝門部匯合形成肝總管。 肝總管與膽囊管匯合形成膽總管。肝外膽管上皮細胞通過控制調(diào)控的分泌和吸收，在保持、調(diào)整和擴大膽小管道結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用。肝外膽管上皮細胞的病變主要引起膽管炎、膽管結(jié)石。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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蛋白酶活化受體4抗體 PAR4
FAM161A蛋白抗體 FAM161A
FBXO22蛋白抗體 FBXO22
磷酸化抑癌蛋白EZH2抗體 phospho-EZH2 (Thr487)
磷酸酯酶-2Ac抗體 PPP4C
1號染色體開放閱讀框181抗體 C1orf181
2號染色體開放閱讀框18抗體 C2orf18
肌動蛋白結(jié)合蛋白CFL抗體 Cofilin
雞馬立克氏病火雞皰疹病毒(HVT)抗體 Marek's disease turkey herpesvirus
PE標(biāo)記小鼠CD38單克隆抗體 mouse CD38/PE
Rabbit Anti-Acetyl-Histone H3 (Lys64) antibody
雙特異性磷酸酶抗體16抗體 DUSP16
碳酸酐酶6抗體 CA6
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大鼠肝外膽管上皮細胞
兔骨膜干細胞
4T1+luc小鼠乳腺癌細胞熒光素酶標(biāo)記
LS1034人結(jié)腸腺癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。