培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
大鼠卵巢內(nèi)膜細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
卵巢組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形細(xì)胞
分類(lèi)
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1633
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1） 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常卵巢組織。
2） 細(xì)胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽(yáng)性。
3） 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5） 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 原代內(nèi)膜 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
卵巢不僅是卵子產(chǎn)生、生長(zhǎng)并成熟的器官，也是腦垂體前葉分泌的靶器官之一。卵巢分為內(nèi)、外側(cè)兩面，其中，內(nèi)側(cè)面朝向盆腔，多與回腸緊鄰。
探明卵巢內(nèi)膜細(xì)胞的增值及功能，在發(fā)情周期和妊娠期發(fā)生變化的機(jī)理及調(diào)控因素，對(duì)進(jìn)一步研究卵泡發(fā)育的調(diào)控、排卵、黃體形成和退化、卵巢等發(fā)病機(jī)理，以及在這些生理和病理過(guò)程中參與其中的及細(xì)胞因子作用機(jī)理均有重要意義。
公司正在出售的產(chǎn)品：
bFGFELISAKit
大鼠20S蛋白酶體(20SP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
20SP ELISA kit
人鈣蛋白酶抑制蛋白(CAST)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanCASTELISAkit
人肌鈣蛋白I（cTnI）elisa檢測(cè)試劑盒
動(dòng)物細(xì)胞醛酮還原酶1C（aldo-keto reductase 1C）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠脂素1(LPIN1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠內(nèi)向整流型鉀離子通道亞家族J成員5(KCNJ5)elisa檢測(cè)試劑盒
ICEBERG蛋白抗體
ICEBERG
褐黑素相關(guān)蛋白ART抗體
AGRP
小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)elisa檢測(cè)試劑盒
防脫載玻片經(jīng)APES處理 50片
細(xì)胞NF KAPPA B P65蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
馬白介素6(IL-6)elisa分析檢測(cè)試劑盒
磷酸甘油酸脫氫酶抗體
PHGDH
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體
CCDC28B
腫瘤/睪丸抗原20抗體 Anti-TSP50
三磷酸腺苷受體P2X5抗體 Anti-P2RX5
原鈣粘蛋白1抗體 Anti-PCDHAC1
SET易位蛋白/髓系白血病相關(guān)蛋白抗體 Anti-SET
PE-Cy5.5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG H&L
大鼠卵巢內(nèi)膜細(xì)胞Rabbit Anti-Avidin / PE
補(bǔ)體因子I輕鏈抗體
NFH_HUMAN; Neurofilament heavy polypeptide; NEFH; KIAA0845; NFH; NF H; NF200; NF-200; Neurofilament 200; 200 kDa neurofilament protein; Neurofilament triplet H protein; Neurofilament H; Neurofilament heavy polypeptide 200kD;
大鼠卵巢內(nèi)膜細(xì)胞
兔肺巨噬細(xì)胞
HCT-15/Taxol人結(jié)直腸癌紫杉醇耐藥株
MC38+LUC小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。