
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人鼻腔黏膜上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
鼻腔黏膜組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
上皮樣 多角形細胞
分類
人原代細胞
貨號
A01X1482
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 細胞來源于人正常鼻腔黏膜組織。
2) 細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代 上皮 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
鼻腔粘膜是覆蓋在人體內呼吸器官管腔內壁的一層組織結構,由上皮組織和疏松結締組織構成。鼻腔粘膜覆蓋于鼻腔表面,粘膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。
上皮的垂直切面上,細胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀,為具有增殖分化能力的干細胞,部分子細胞向淺層移動?;讓右陨鲜菙?shù)層多邊形細胞,再上為幾層梭形或扁平細胞。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀,基底層細胞能不斷分裂增生,以補充表層衰老或損傷脫落的細胞。復層扁平上皮深層的結締組織內有豐富的,有利于復層扁平上皮的營養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人白介素7(IL-7)elisa檢測試劑盒免費代測
谷氨酸脫氫酶(GDH)測試盒
RUNX3蛋白表達西方雜交分析試劑盒
小鼠白三烯B4(LTB4)elisa檢測試劑盒
大鼠5-羥色胺轉運體(5-HTT/SERT)elisa檢測試劑盒
絲氨酸/蘇氨酸激酶33抗體 Anti-STK33
核糖體S6蛋白激酶抗體 Anti-RPS6KB1
泛素樣蛋白NEDD8抗體 Anti-NEDD8
鋅指蛋白230抗體 Anti-ZNF230/RNF141
細胞纖毛內轉運源蛋白81抗體 IFT81
銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體 APPL1
α肌糖蛋白2抗體 alpha Sarcoglycan
δ-連環(huán)蛋白抗體 CTNND2/delta 2 Catenin
ATP依賴解旋酶DDX1抗體 DDX1
B細胞激酶抗體 BLK
辣根酶標記的綠色熒光蛋白TurboGFP單克隆抗體 TurboGFP, HRP conjugated
鏈激酶抗體 Streptokinase
中胚層配對源蛋白2抗體 PRRX2
腫瘤抑制基因LATS1抗體 LATS1
干擾素α1b抗體 IFN alpha
孤兒核受體TAK1抗體 NR2C2
KMO蛋白抗體 KMO
MAP3K13蛋白抗體 MAP3K13/LZK
染色質修飾蛋白CHMP7抗體 CHMP7
軟骨細胞Ezrin樣蛋白抗體 FARP1
通用型馬傳染性貧血(Equine Infectious Anemia;EIA)
人鼻腔黏膜上皮細胞Aβ1-40 ELISA Kit
人核糖體合成蛋白NSA2源物(NSA2)elisa分析檢測試劑盒
A1B; A1BG_HUMAN; ABG; Alpha 1 B glycoprotein; Alpha-1-B glycoprotein; Alpha-1B-glycoprotein; alpha 1B Glycoprotein; DKFZp686F0970; GAB; HYST2477.
人鼻腔黏膜上皮細胞
人胃平滑肌細胞
Spc-a-1(肺腺癌細胞)
MV3人黑色素瘤細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。