培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
骨組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1436
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于人正常骨組織。
2）細(xì)胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）熒光染色為陽性。
3）經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5）細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 內(nèi)皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
骨的微循環(huán)系統(tǒng)是骨微環(huán)境的重要組成部分，是骨內(nèi)物質(zhì)交換，向骨及骨內(nèi)其它細(xì)胞運(yùn)送養(yǎng)料和排除廢物的主要場所。通常，微循環(huán)血流能滿足骨內(nèi)各種組織代謝需要，使骨內(nèi)各種細(xì)胞功能得以正常進(jìn)行。
骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成了骨內(nèi)微血管的內(nèi)襯，其不僅僅是血管與周圍組織之間的屏障，也與其它器官微血管內(nèi)皮細(xì)胞一樣，對局部骨組織代謝具有重要的調(diào)控作用，參與了許多骨的病理生理過程，再骨吸收、新骨的形成、血管再生、營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、骨內(nèi)代謝產(chǎn)物輸出及維持骨內(nèi)微環(huán)境平衡方面具有重要作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
飲料D-葡萄糖酸鹽比色法定量檢測試劑盒
組織甘油-3-磷酸脫氫酶-2（Glycerol-3-Phosphate Dehydrogenase-2）活性比色法定量檢測試劑盒
人百日咳病毒抗體(IgA)elisa檢測試劑盒
大鼠成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)elisa檢測試劑盒
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)elisa檢測試劑盒
溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體 Anti-SLC1A5
環(huán)指蛋白34抗體 Anti-RNF34
神經(jīng)氨酸酶4抗體 Anti-NEU4
信號通路Wnt3a抗體 Anti-Wnt3a
轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體
轉(zhuǎn)綠激活蛋白SRCAP抗體 SRCAP
過氧化物酶體膜蛋白4抗體 PXMP4
核受體輔助抑制因子1抗體 NCoR1
NCK銜接蛋白1重組兔單克隆抗體 NCK1
N-鈣粘附分子抗體 N-cadherin
乳腺癌易感基因環(huán)狀結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 BARD1
神經(jīng)叢蛋白A3抗體 Plexin A3
DDX58抗體 DDX58
DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體 TOP2A
磷酸化蛋白激酶C mu型抗體 phospho-PRKD1 (Tyr463)
磷酸化剪接因子1抗體 phospho-SF1 (Ser82)
胞外分泌型絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶FAM20C抗體 FAM20C
補(bǔ)體C9b抗體 Complement component C9b
線粒體融合蛋白Mfn2單克隆抗體 Mitofusin 2
鋅指蛋白366抗體 ZNF366
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)elisa檢測試劑盒
人骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠25羥基膽固醇(25-OHC)elisa分析檢測試劑盒
大鼠細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)因子BAX(BAX)elisa檢測試劑盒
FKH L6; FKHL 6; FKHL6; Forkhead box F2; Forkhead box protein F2; Forkhead like 6; Forkhead related activator 2; Forkhead related protein FKHL6; Forkhead related transcription factor 2; FOX F2; FOXF 2; FREAC 2; FREAC2; OTTHUMP00000017863;
人骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞
人舌表皮細(xì)胞
人胰腺癌細(xì)胞；Patu8988T (STR)
NCI-H1993人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。