
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人肌腱細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肌腱組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1431
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性:
1)組織來源于術(shù)后的人肌腱組織。
2)細(xì)胞鑒定:Ⅰ型膠原熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 肌腱 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
肌腱細(xì)胞是肌腱組織的基本功能單位,主要合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和糖蛋白基質(zhì),維持肌腱組織的新陳代謝。
肌腱損傷后的方式包括內(nèi)源性和外源性,而理想的方式是控制外源性,促進內(nèi)源性。內(nèi)源性的機制是肌腱細(xì)胞通過細(xì)胞自身的增殖從而促進肌腱,但目前肌腱細(xì)胞在體外經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)后會喪失分裂增殖能力。
目前已知多種因素影響肌腱過程,其中與肌腱關(guān)系密切的有著重要調(diào)控作用的細(xì)胞因子主要有:堿性成纖維生長因子,轉(zhuǎn)化生長因子 β,骨形態(tài)發(fā)生蛋白-12,血管內(nèi)皮生長因子,胰島素樣生長因子-1,血小板源性生長因子等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IL-2ELISAkit
魚巨噬細(xì)胞遷移抑制因子(MIF)elisa分析檢測試劑盒
MIF ELISA kit
人補體片段3b受體(C3bR)elisa分析檢測試劑盒
HumanC3bRELISAKit
YPD培養(yǎng)基
活性檢測試劑盒-CCK8250T
大鼠髓過氧化物酶(MPO)elisa檢測試劑盒
組織尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑(uPA)活性比色法定量檢測試劑盒
毛發(fā)角蛋白34抗體
KRT34
巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白7抗體
BBS7
精子相關(guān)抗原6抗體 Anti-SPAG6
磷酸化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體 Anti-phospho-RPH3AL(Ser232)
磷酸化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 Anti-phospho-NRP1(Thr916)
磷酸化鋅指蛋白598抗體 Anti-phospho-ZNF598(Tyr306)
電壓門控鈉通道SCN3α蛋白/Na+ CP type IIIα抗體
SCN3A
眼鏡蛇蛇毒蛋白抗體
Cobra poison Protein
腫瘤相關(guān)胰蛋白酶抑制劑1抗體 Anti-SPINK1/SPINK3
原鈣粘蛋白γB5抗體 Anti-PCDHGB5
鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶1β/CaMKIβ抗體 Anti-PNCK
星形細(xì)胞瘤高表達(dá)蛋白抗體(環(huán)指蛋白100) Anti-TRIM47
羊抗小鼠IgM
人肌腱細(xì)胞細(xì)胞色素b5含量測試盒
LoTE分子生物級溶液
CATA_HUMAN; Catalase; EC:1.11.1.6.
人肌腱細(xì)胞
人肉芽成纖維細(xì)胞
人甲狀腺癌細(xì)胞; HTh-7 (STR)
NCI-H211 [H211]人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。